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免疫分析 實驗室流程

ELISA 標準曲線擬合器(4PL/5PL)

從 ELISA 標準品擬合 4PL/5PL 曲線並估算未知濃度。可比較加權、殘差與回收率,並用分享 URL 或 CSV/JSON 匯出結果。

所有計算都在瀏覽器內完成。你的資料不會送出。

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使用方法(3 步驟)

  1. 選擇範例,或貼上標準品資料(濃度與訊號)。
  2. 選擇 4PL/5PL、加權方式與空白處理等設定。
  3. 頁面會顯示曲線、未知濃度與外推旗標。

這是模型估算。超出標準範圍的外推可能不準;只有在需要時才使用空白扣除。

需要判斷空白、4PL/5PL 或外推嗎?

這個工具負責實際擬合、加權比較、回收率檢查與未知濃度估算。建議先用 4PL,檢查殘差和回收率;只有在標準曲線明顯不對稱時,再嘗試 5PL。

若需要整理空白處理、模型選擇、範圍判定與報告寫法,請參考 測定標準曲線指南

資料與設定

每列至少包含濃度與 OD/訊號;可加入 label 欄位標記重複孔。

可填入 dilution_factor,結果會同時計算量測濃度與原樣本濃度。

結果

模型
標準點
加權
RMSE
AIC
空白平均
模型比較

R² 與 AIC 只是參考,仍需檢查殘差、回收率與外推旗標。

標準曲線

將滑鼠移到點上可查看細節。
已排除濃度

殘差圖(選用)

參數(A、B、C、D、G)

參數95% CI(約略)

指南:A=底部(低濃度)、D=頂部(高濃度)、C=EC50(中點)、B=Hill 斜率、G=不對稱(僅 5PL)。內部以 exp(B·ln(x/C)) 計算 (x/C)^B;x 軸的 Log10 僅為方便閱讀。

QC(反算/回收率)

標籤標稱濃度平均訊號反算濃度回收率

未知樣本(y → 濃度)

樣本平均訊號DF量測濃度原樣本濃度旗標

計算方法

數值是判讀輔助。請同時確認離群點、標準範圍、稀釋倍數與實驗條件。

還在判斷空白、加權或 4PL/5PL 嗎?

先看測定標準曲線指南,可以把空白扣除、4PL 與 5PL 的選擇、外推風險和報告中應交代的判斷標準整理清楚,再回來執行擬合。

常見問題

我應該使用 4PL 還是 5PL?

4PL 通常已足夠。若標準曲線明顯不對稱,再用 5PL 並比較 AIC、殘差與回收率。

我需要加權(1/y、1/y²)嗎?

不一定。建議先不加權;若整個範圍出現偏差,再嘗試加權。

濃度 0(空白)要怎麼處理?

預設會將空白排除在擬合之外,較適合 log x。只有在需要時才使用空白扣除。

未知樣本超出標準範圍時怎麼辦?

頁面會標示為外推。外推準確度較低,建議稀釋或重測,使訊號落在範圍內。

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