Cómo utilizar (3 pasos)
- Selecciona un ejemplo o pega estándares (concentración y señal).
- Elige 4PL/5PL, ponderación y otras configuraciones.
- Aparecen la curva y las concentraciones desconocidas (se señala la extrapolación).
Este es un modelo. La extrapolación fuera del rango estándar puede ser inexacta. Usa la resta de blanco solo cuando sea necesario.
¿Dudas con el blanco, 4PL/5PL o la extrapolación?
Esta página sirve para ejecutar el ajuste ELISA, probar ponderaciones, revisar recuperación y estimar concentraciones desconocidas. Si necesitas decidir cómo tratar el blanco, cuándo 5PL aporta algo real o cómo explicar una extrapolación, abre antes la guía de curvas estándar de ensayos.
Entradas (estándares, incógnitas, configuraciones)
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Opciones de visualización
Columnas mínimas: concentración y señal. Varias filas con la misma concentración se tratan como réplicas.
Columnas mínimas: muestra y señal. Si factor_dilucion está vacío, se toma como 1.
Resultados (curva y concentraciones)
R² y AIC son guías. Comprueba también los residuos y si los valores se extrapolan.
Curva estándar
Parcela residual (opcional)
Parámetros (A, B, C, D, G)
| parámetro | valor | IC del 95% (aprox.) |
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Guía: A=Abajo (baja concentración), D=Arriba (alta), C=EC50 (punto medio), B=pendiente de Hill, G=asimetría (solo 5PL). Internamente calculamos (x/C)^B como exp(B·ln(x/C)). Log10 en el eje x es para facilitar la lectura.
Control de calidad (cálculo retroactivo/recuperación)
| etiqueta | Concentración nominal | Señal media | Conc. ajustada | Recuperación (%) |
|---|
Incógnitas (y → concentración)
| muestra | Señal media | Factor dilución | Conc. medida | Conc. original | Estado |
|---|
Cómo se calcula
- Ajusta una curva logística 4PL/5PL con mínimos cuadrados no lineales.
- Las concentraciones desconocidas se calculan invirtiendo la curva ajustada.
- La ponderación (1/y, 1/y², etc.) puede ayudar a manejar la variación entre los rangos de concentración.
Los valores son guías. Comprueba también los valores atípicos, los rangos estándar y las condiciones de dilución.
Preguntas frecuentes
¿Debo usar 4PL o 5PL?
4PL suele ser suficiente. Usa 5PL si se necesita asimetría (compáralo con AIC, etc.).
¿Necesito ponderación (1/y, 1/y²)?
No es necesario. Empieza sin ponderar y pruébalo si aparece un sesgo en todo el rango.
¿Cómo debo manejar la concentración 0 (en blanco)?
De forma predeterminada, los blancos se excluyen del ajuste (funciona bien con log x). Usa la resta de blanco solo si es necesario.
Un valor desconocido está fuera del rango estándar.
Se mostrará como extrapolado. La precisión disminuye, así que diluye y vuelve a medir dentro del rango.
¿Qué debo hacer primero en esta página?
Empieza con los campos obligatorios y ejecuta un caso base. Mantén los valores opcionales por defecto para comparar cambios con claridad.
Interpretación y páginas siguientes
Deja esta página centrada en el ajuste ELISA. La guía sirve para decidir cómo tratar el blanco, cuándo 5PL compensa de verdad y cómo explicar una extrapolación o un rango dudoso.
- Guía de curvas estándar de ensayosReúne criterios de blanco, modelo, extrapolación y redacción del informe para proteína y ELISA.
- Calculadora de curva estándar de proteínas (BCA / Bradford)Cambia aquí cuando el flujo sea un ensayo de proteínas y no una curva ELISA sigmoidal.
- Calculadora de concentración y pureza del A260 (A260/280, A260/230)Úsala antes del ensayo cuando todavía haya dudas sobre concentración o pureza de la muestra.
- Calculadora de regresión linealAbre una regresión más simple cuando quieras revisar pendiente, intercepto y residuales sin todo el flujo ELISA.
Comentarios
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