Respuesta rápida
Si ya tiene una lectura de NanoDrop o espectrofotómetro, esta página le devuelve concentración DNA/RNA, A260/280, A260/230 y, si quiere, la cantidad total en un solo paso.
Útil para decidir rápido si la muestra pasa a qPCR, limpieza, preparación de librerías o conversión a copias.
Cómo utilizar (3 pasos)
- Seleccione el tipo de ácido nucleico (dsDNA/RNA, etc.) e ingrese A260/A280/A230.
- Si se mide con dilución, ingrese el factor de dilución (sin dilución = 1).
- La concentración y las proporciones aparecen automáticamente. Agregue volumen para ver la cantidad total.
Casos típicos: comprobar si una extracción está suficientemente limpia, decidir si conviene repetir la lectura o preparar el paso siguiente hacia qPCR o NGS.
Los factores y las guías de proporciones de A260 varían según la muestra y las condiciones. Se muestran como referencias; confirme con su ensayo.
Entrada (tipo, A260/A280/A230, dilución)
—
dsDNA=50 y RNA=40 son guías comunes. Utilice un factor personalizado si es necesario.
Corrección en blanco (opcional)
Muchos instrumentos ya aplican la corrección en blanco. Habilítelo solo si es necesario.
Resultados (concentración y ratios)
Los resultados aparecerán aquí una vez que ingrese los valores.
Acerca de las guías de proporciones (referencia)
—
1 µg/mL = 1 ng/µL (mismo valor numérico).
La interpretación de la proporción depende del ensayo; esta página no hace juicios definitivos.
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Como se calcula
- Concentración (μg/mL) = A260 × factor × dilución (dsDNA=50, RNA=40 son guías)
- A260/280 = A260 ÷ A280 (A280 ≠ 0)
- A260/230 = A260 ÷ A230 (A230 ≠ 0)
- Al ingresar el volumen se calcula la cantidad total (ng/μg)
Cómo usar este resultado en la práctica
Empiece con una medición base y cambie solo una variable cada vez. Así es más fácil ver si la diferencia viene de la dilución, del factor elegido o de la corrección en blanco.
Qué revisar primero
- Confirme el tipo de ácido nucleico antes de aceptar el factor por defecto.
- Use A260/280 y A260/230 como referencias de interpretación, no como diagnóstico definitivo.
- Si añade volumen, verifique que la cantidad total coincida con lo que espera recuperar del tubo.
Cómo validar que el resultado es coherente
Revise si la concentración corregida sigue una escala razonable cuando cambia la dilución. Si el valor absoluto parece plausible pero las razones cambian demasiado, el problema suele estar en el blanco o en la calidad de la muestra, no en la fórmula.
Cuándo repetir la medición
Si las razones cambian demasiado al corregir el blanco o al probar otra dilución, conviene revisar la medición original antes de compartir el valor final.
Siguiente paso recomendado
Cuando la concentración ya sea fiable, continúe con la conversión DNA/RNA a molaridad o copias, la curva estándar de qPCR o el cálculo de Tm de cebadores según su flujo experimental.
Preguntas frecuentes
¿Es fijo el factor dsDNA de 50?
Es una guía de uso común, pero puede variar según la muestra y las condiciones. Utilice un factor personalizado si es necesario.
¿Qué indican A260/280 y A260/230?
A menudo se citan como guías para la contaminación por proteínas o sal/solventes, pero no son definitivas.
¿Qué muestra el volumen entrante?
Calcula la cantidad total (ng/μg) en el tubo a partir de la concentración.
¿Necesito corrección en blanco?
Muchos instrumentos corrigen internamente. Habilítelo sólo si es necesario.
¿Se envían los datos a alguna parte?
Todos los cálculos se ejecutan en su navegador; Los datos no se envían.
Guía rápida para decidir el siguiente paso
- Si la concentración parece razonable pero A260/280 o A260/230 cambia demasiado, repita la medición o revise la corrección en blanco antes de informar el valor.
- Si la muestra tiene poco rendimiento o es crítica, confirme la concentración con un método de fluorescencia antes de fijar la dilución final.
- Si la muestra es aceptable y va a seguir con expresión génica, continúe con la curva estándar de qPCR o con ΔΔCt.
- Si la muestra es aceptable y va a preparar librerías o pooling, convierta primero a nM y luego siga con la concentración de librería NGS.
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