Resposta rápida
Se você já tem uma leitura de NanoDrop ou espectrofotômetro, esta página entrega de uma vez a concentração de DNA/RNA, A260/280, A260/230 e, se quiser, a quantidade total.
Útil para decidir rápido se a amostra segue para qPCR, cleanup, preparo de library ou conversão para número de cópias.
Como usar (3 passos)
- Selecione o tipo de ácido nucleico (dsDNA/RNA, etc.) e insira A260/A280/A230.
- Se medido com diluição, insira o fator de diluição (sem diluição = 1).
- A concentração e as proporções aparecem automaticamente. Adicione volume para ver o valor total.
Casos típicos: verificar se a extração está limpa o bastante, decidir se vale medir de novo e preparar o próximo passo para qPCR ou NGS.
Os fatores e guias de proporção do A260 variam de acordo com a amostra e as condições. São apresentados como referências; confirme com seu ensaio.
Entrada (tipo, A260/A280/A230, diluição)
—
dsDNA=50 e RNA=40 são guias comuns. Use um fator personalizado, se necessário.
Correção em branco (opcional)
Muitos instrumentos já aplicam correção em branco. Habilite apenas se necessário.
Resultados (concentração e proporções)
Os resultados aparecerão aqui assim que você inserir os valores.
Sobre guias de proporção (referência)
—
1 µg/mL = 1 ng/µL (mesmo valor numérico).
A interpretação da proporção depende do ensaio; esta página não faz julgamentos definitivos.
Exportar (copiar / CSV / LaTeX / compartilhar URL)
Como é calculado
- Concentração (µg/mL) = A260 × fator × diluição (dsDNA=50, RNA=40 são guias)
- A260/280 = A260 ÷ A280 (A280 ≠ 0)
- A260/230 = A260 ÷ A230 (A230 ≠ 0)
- Inserir o volume calcula a quantidade total (ng/µg)
Como interpretar o resultado com mais segurança
Use uma medição base e altere apenas um campo por vez. Assim fica mais fácil ver se a diferença veio da diluição, do fator escolhido ou da correção de branco.
O que vale conferir primeiro
- Confirme o tipo de ácido nucleico antes de manter o fator padrão.
- Leia A260/280 e A260/230 como referências práticas, não como diagnóstico final.
- Se informar o volume, compare a quantidade total com o rendimento esperado da amostra.
Como validar a coerência do número
Observe se a concentração corrigida continua em uma faixa plausível quando a diluição muda. Se a concentração parecer boa, mas as razões variarem demais, o problema costuma estar no branco ou na qualidade da amostra, não na conta.
Quando medir de novo
Se as razões mudarem muito depois da correção de branco ou com outra diluição, vale revisar a medição original antes de usar o número final em relatório ou compartilhamento.
Próximo passo recomendado
Depois de validar a concentração, siga para o conversor DNA/RNA para molaridade ou cópias, a curva padrão de qPCR ou o calculador de Tm de primer, conforme o seu fluxo experimental.
Perguntas frequentes
O fator dsDNA de 50 é fixo?
É um guia comumente usado, mas pode variar de acordo com a amostra e as condições. Use um fator personalizado, se necessário.
O que indicam A260/280 e A260/230?
Eles são frequentemente citados como guias para contaminação por proteínas ou sal/solventes, mas não são definitivos.
O que mostra o volume de entrada?
Calcula a quantidade total (ng/µg) no tubo a partir da concentração.
Preciso de correção em branco?
Muitos instrumentos corrigem internamente. Ative-o apenas se necessário.
Os dados são enviados para algum lugar?
Todos os cálculos são executados no seu navegador; os dados não são enviados.
Guia rápido para o próximo passo
- Se a concentração parecer coerente, mas A260/280 ou A260/230 variar demais, repita a medição ou revise a correção de branco antes de usar o valor.
- Se a amostra tiver baixo rendimento ou for importante, confirme a concentração com um método por fluorescência antes de fechar a diluição final.
- Se a amostra estiver aceitável e você for para expressão gênica, siga para a curva padrão de qPCR ou para o fluxo ΔΔCt.
- Se a amostra estiver aceitável e você for preparar library ou pooling, converta primeiro para nM e depois siga para a concentração de library NGS.
Comentários (opcional)
Os comentários são carregados apenas quando você precisa deles, para manter a página leve.