Jawaban cepat
Jika Anda sudah punya pembacaan NanoDrop atau spektrofotometer, halaman ini langsung memberi konsentrasi DNA/RNA, A260/280, A260/230, dan bila perlu jumlah total.
Cocok untuk cepat memutuskan apakah sampel lanjut ke qPCR, tahap pembersihan, persiapan library, atau konversi ke jumlah salinan.
Cara menggunakan (3 langkah)
- Pilih jenis asam nukleat (dsDNA/RNA, dll.) dan masukkan A260/A280/A230.
- Jika diukur dengan pengenceran, masukkan faktor pengenceran (tidak ada pengenceran = 1).
- Konsentrasi dan rasio muncul secara otomatis. Tambahkan volume untuk melihat jumlah total.
Kasus umum: mengecek apakah hasil ekstraksi cukup bersih, memutuskan apakah perlu ukur ulang, lalu meneruskan ke qPCR atau NGS.
Faktor A260 dan kisaran rasio dapat berbeda menurut sampel dan kondisi. Gunakan angka di halaman ini sebagai acuan awal, lalu sesuaikan dengan metode uji Anda.
Masukan (tipe, A260/A280/A230, pengenceran)
—
dsDNA=50 dan RNA=40 adalah panduan umum. Gunakan faktor khusus jika diperlukan.
Koreksi kosong (opsional)
Banyak instrumen yang sudah menerapkan koreksi blanko. Aktifkan hanya jika diperlukan.
Hasil (konsentrasi & rasio)
Hasil akan muncul di sini setelah Anda memasukkan nilai.
Tentang panduan rasio (referensi)
—
1 µg/mL = 1 ng/µL (nilai numerik yang sama).
Interpretasi rasio bergantung pada pengujian; halaman ini tidak membuat penilaian pasti.
Ekspor (salin / CSV / LaTeX / bagikan URL)
Bagaimana cara menghitungnya
- Konsentrasi (µg/mL) = A260 × faktor × pengenceran (dsDNA=50, RNA=40 adalah panduan)
- A260/280 = A260 ÷ A280 (A280 ≠ 0)
- A260/230 = A260 ÷ A230 (A230 ≠ 0)
- Memasukkan volume menghitung jumlah total (ng/µg)
Cara membaca hasil dengan cepat
Mulailah dari satu hasil dasar lalu ubah satu input saja. Dengan begitu Anda bisa melihat apakah perbedaan datang dari pengenceran, faktor yang dipilih, atau koreksi blanko.
Hal yang perlu dicek
- Pastikan tipe asam nukleat sudah benar sebelum memakai faktor bawaan.
- Gunakan A260/280 dan A260/230 sebagai panduan praktis, bukan keputusan akhir.
- Jika Anda mengisi volume, cocokkan jumlah total dengan hasil ekstraksi yang diharapkan.
Cara memastikan hasilnya masuk akal
Lihat apakah konsentrasi terkoreksi masih bergerak wajar saat Anda mengubah pengenceran. Jika angka konsentrasi tampak masuk akal tetapi rasionya bergeser tajam, penyebabnya sering ada pada blanko atau kualitas sampel, bukan pada rumus.
Kapan perlu ukur ulang
Jika rasio berubah jauh setelah koreksi blanko atau setelah mencoba pengenceran lain, sebaiknya periksa ulang pengukuran awal sebelum membagikan angka final.
Langkah berikutnya
Setelah konsentrasi sudah stabil, lanjutkan ke konverter DNA/RNA ke molaritas atau salinan, kurva standar qPCR, atau kalkulator Tm primer sesuai alur kerja Anda.
Pertanyaan umum
Apakah faktor dsDNA 50 tetap?
Ini adalah panduan yang umum digunakan, namun dapat bervariasi berdasarkan sampel dan kondisi. Gunakan faktor khusus jika diperlukan.
Apa yang ditunjukkan oleh A260/280 dan A260/230?
Pedoman ini sering disebut sebagai pedoman kontaminasi protein atau garam/pelarut, namun pedoman ini tidak bersifat definitif.
Apa yang ditunjukkan dengan memasuki volume?
Ini menghitung jumlah total (ng/µg) dalam tabung dari konsentrasi.
Apakah saya memerlukan koreksi kosong?
Banyak instrumen yang mengoreksi secara internal. Aktifkan hanya jika diperlukan.
Apakah datanya dikirim ke mana saja?
Semua penghitungan dijalankan di browser Anda; data tidak terkirim.
Panduan cepat untuk langkah berikutnya
- Jika konsentrasi terlihat masuk akal tetapi A260/280 atau A260/230 berubah terlalu jauh, ukur ulang atau cek lagi koreksi blanko sebelum memakai angka itu.
- Jika sampel hasilnya rendah atau penting, konfirmasikan konsentrasi dengan metode fluoresensi sebelum menetapkan rencana pengenceran akhir.
- Jika sampel sudah layak dan Anda lanjut ke analisis ekspresi, teruskan ke kurva standar qPCR atau alur ΔΔCt.
- Jika sampel sudah layak dan Anda menyiapkan library atau pooling, ubah dulu ke nM lalu lanjut ke konsentrasi library NGS.
Komentar (opsional)
Komentar dimuat hanya saat Anda membutuhkannya, agar halaman tetap ringan.