快速结论
如果您已经有 NanoDrop 或分光光度计读数,这里可以一次给出 DNA/RNA 浓度、A260/280、A260/230,以及可选的总量。
适合快速判断样本是否进入 qPCR、清理步骤、建库流程,或继续换算成拷贝数。
使用方法(3步)
- 选择核酸类型(dsDNA/RNA等)并输入A260/A280/A230。
- 如果使用稀释进行测量,请输入稀释系数(无稀释 = 1)。
- 浓度和比率自动显示。添加体积以查看总量。
常见用途:先判断提取产物是否足够干净、是否值得重测,然后再把结果交给 qPCR 或 NGS 下游步骤。
A260 换算因子和比值参考范围会随样品与实验条件而变化。这里给出的内容仅作参考,请结合您的检测方法确认。
输入(类型,A260/A280/A230,稀释)
—
dsDNA=50 和 RNA=40 是常用指南。如果需要,请使用自定义因子。
空白校正(可选)
许多仪器已经应用空白校正。仅在需要时启用。
结果(浓度和比率)
输入值后,结果将显示在此处。
关于比例指南(参考)
—
1 µg/mL = 1 ng/µL(相同数值)。
比率解释取决于测定;本页面不做出明确判断。
导出(复制/CSV/LaTeX/共享URL)
计算方法
- 浓度 (μg/mL) = A260 × 因子 × 稀释度(dsDNA=50,RNA=40 为参考值)
- A260/280 = A260 ÷ A280 (A280 ≠ 0)
- A260/230 = A260 ÷ A230 (A230 ≠ 0)
- 输入体积计算总量(ng/μg)
如何更稳妥地解读结果
建议先保留一组基准测量,再一次只调整一个条件。这样更容易判断变化来自稀释倍数、换算因子,还是空白校正。
先看哪些项目
- 先确认核酸类型是否正确,再接受默认因子。
- 把 A260/280 和 A260/230 当作参考区间,不要直接当作最终结论。
- 如果填写了体积,请顺手核对总量是否符合预期回收量。
如何判断结果是否一致
可以比较不同稀释倍数下校正后浓度是否仍然在合理范围内。如果浓度看起来正常,但两个比值大幅波动,问题往往更接近空白设置或样本质量,而不是计算公式本身。
什么时候值得重测
如果空白校正后比值变化很大,或换一个稀释倍数后结果明显漂移,最好先复查原始测量,再记录最终数字。
下一步建议
当浓度已经可信时,可以继续使用 DNA/RNA 浓度转摩尔浓度/拷贝数换算、qPCR 标准曲线 或 引物 Tm 计算器 进入下游分析。
常见问题
dsDNA 因子 50 是固定的吗?
它是常用的指南,但可能会因样品和条件而异。如果需要,请使用自定义因子。
A260/280和A260/230表示什么?
它们经常被引用作为蛋白质或盐/溶剂污染的指南,但它们并不是确定的。
输入音量显示什么?
它根据浓度计算试管中的总量 (ng/μg)。
我需要空白校正吗?
许多仪器在内部进行校正。仅在需要时启用它。
数据发送到任何地方了吗?
所有计算都在您的浏览器中运行;数据未发送。
快速判断下一步
- 如果浓度看起来合理,但 A260/280 或 A260/230 波动很大,先重测或复查空白校正,再决定是否采用该数值。
- 如果样本产量低或样本很重要,建议先用荧光法再次确认浓度,再制定最终稀释方案。
- 如果样本状态可接受且要进入表达分析,可继续使用 qPCR 标准曲线或 ΔΔCt 流程。
- 如果样本状态可接受且要做建库或 pooling,先换算成 nM,再进入 NGS 文库浓度流程。
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