使用方法（3步）
- 粘贴标准点（数量、Ct）或加载 CSV 文件。具有相同数量的行被视为重复项。
- 选择回归方法 (OLS/WLS) 和选项，例如 95% 带。如果有未知的 Ct 值，请输入它们。
- 单击计算可查看标准曲线、效率、QC 检查、未知估计值和步骤日志。共享 URL 保持相同的设置。
推荐订单
- 首先，建立标准曲线 （本页）
- 接下来，回顾PCR效率（%） → 跳转到效率
- 如果需要，计算相对表达量 (ΔCt / ΔΔCt) → ΔCt / ΔΔCt
更深入
数据输入和选项
结果（摘要）
PCR 效率 (%)
由斜率 m 计算为 Efficiency = (10^(-1/m) - 1) × 100。显示的范围仅供参考。
初始结果使用预设标准曲线；粘贴自己的数据并计算即可更新。
| n（点数） | 15 |
|---|---|
| k（水平数） | 5 |
| 斜率 m | -3.32 |
| 截距 b | 38.24 |
| R² | 1 |
| 效率 (%) | 100.1 |
范围是指南。对于研究/教育，一起审查标准点和残差。
质量检查（指南）
效率（参考：90-110%）
100.1%在参考范围内
效率 = (10^(-1/m) - 1) × 100
斜率（参考：-3.6 至 -3.1）
-3.32在参考范围内
理想值约 -3.32
R²（参考：> 0.98）
1在参考范围内
线性度参考
重复 SD（参考：≤ 0.5 Ct）
0/5 / 0.03 Ct在参考范围内
5 个水平中 0 个超出范围；最大 SD 0.03 Ct
稀释系列 ΔCt (D=10)
3.3219 / 0.0019在参考范围内
期望 3.3219；最大差 0.0019
浓度水平（平均值±标准差）
| 数量 | log10Q | n | CT_平均值 | CT_SD |
|---|---|---|---|---|
| 1e+7 | 7 | 3 | 15 | 0.03 |
| 1e+6 | 6 | 3 | 18.32 | 0.03 |
| 100000 | 5 | 3 | 21.64 | 0.03 |
| 10000 | 4 | 3 | 24.96 | 0.03 |
| 1000 | 3 | 3 | 28.28 | 0.03 |
标准点（拟合行）
可以切换高级列（重量/yhat/残差/杠杆/cooksD）。
| 数量 | log10Q | CT | 重量 | 是的 | 残差 | 杠杆 | 厨师D |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1e+7 | 7 | 14.97 | 1 | 15 | -0.03 | 0.2 | 0.203125 |
| 1e+7 | 7 | 15 | 1 | 15 | 0 | 0.2 | 0 |
| 1e+7 | 7 | 15.03 | 1 | 15 | 0.03 | 0.2 | 0.203125 |
| 1e+6 | 6 | 18.29 | 1 | 18.32 | -0.03 | 0.1 | 0.080247 |
| 1e+6 | 6 | 18.32 | 1 | 18.32 | 0 | 0.1 | 0 |
未知样品（Ct → 数量）
| 样品 | CT | log10Q_帽子 | 数量_帽子 | DF | 修正数量 |
|---|---|---|---|---|---|
| U1 | 20 | 5.493976 | 311871.654 | 1 | 311871.654 |
| U2 | 23.5 | 4.439759 | 27527.0097 | 1 | 27527.0097 |
标准曲线和残差
将鼠标悬停点可查看详细信息。
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计算步骤（如何计算）
教育工作者须知
- 打开/关闭 OLS/WLS 和截距以比较斜率、残差和 QC 指南的变化。
- 通过重复，每个水平的平均值和标准差有助于讨论变异性、异常值和权重。
常见问题
什么是 qPCR 标准曲线？
通过拟合 Ct 与 log10（数量）将标准数量（拷贝数或浓度）与 Ct 关联起来的曲线。它有助于检查线性度 (R²) 和放大效率。
需要多少标准分？
至少需要两个点才能拟合一条线。对于线性和异常值检查，建议使用 4-6 个点。
PCR 效率 (%) 是如何计算的？
根据坡度 m：效率 = (10^(-1/m) - 1) × 100。显示的范围仅供参考。
-3.32 附近的斜率表明什么？
对于 10 倍稀释系列，接近 -3.32 的斜率对应于约 100% 的表观效率（理想指南）。
效率能超过100%吗？
由于它是根据斜率推断的，因此由于稀释误差或抑制，可能会出现超过 100% 的表观值。将其作为指南并检查残差和标准点。
共享 URL 是否包含数据？
仅保存设置（方法和波段选项）。不包括标准和未知数据。
数量应该使用什么单位？
任何单位都可以（拷贝数、ng、浓度）。 log10 的数量必须为正。
相关工具
参考文献（注释）
本页显示的指南是一般参考。对于研究/教育，请根据需要查阅主要来源。
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