使用方法（3步）
- 貼上標準點（數量、Ct）或載入 CSV 檔案。具有相同數量的列被视為重複測定。
- 選擇迴歸方法 (OLS/WLS) 和選項，例如 95% 帶。如果有未知的 Ct 值，請輸入它們。
- 按一下計算可查看標準曲線、效率、QC 檢查、未知估計值和步驟日誌。分享連結 保持相同的設定。
建議流程
- 首先，建立標準曲線 （本頁）
- 接著，回顾PCR效率（%） → 跳轉到效率
- 如果需要，計算相對表現量量 (ΔCt / ΔΔCt) → ΔCt / ΔΔCt
延伸使用
資料輸入與選項
結果（摘要）
PCR 效率 (%)
由斜率 m 計算為 Efficiency = (10^(-1/m) - 1) × 100。顯示的範圍僅供參考。
初始結果使用預設標準曲線；貼上自己的資料並計算即可更新。
| n（點數） | 15 |
|---|---|
| k（level 數） | 5 |
| 斜率 m | -3.32 |
| 截距 b | 38.24 |
| R² | 1 |
| 效率 (%) | 100.1 |
範圍是指南。對於研究/教育，一起审查標準點和殘差。
質量檢查（指南）
效率（建議：90-110%）
100.1%在建議範圍內
效率 = (10^(-1/m) - 1) × 100
斜率（建議：-3.6 至 -3.1）
-3.32在建議範圍內
理想值約 -3.32
R²（建議：> 0.98）
1在建議範圍內
線性度參考
重複測定 SD（建議：≤ 0.5 Ct）
0/5 / 0.03 Ct在建議範圍內
5 個 level 中 0 個超出範圍；最大 SD 0.03 Ct
稀釋系列 ΔCt (D=10)
3.3219 / 0.0019在建議範圍內
期望 3.3219；最大差 0.0019
濃度水準（平均值±標準差）
| 數量 | log10Q | n | CT_平均值 | CT_SD |
|---|---|---|---|---|
| 1e+7 | 7 | 3 | 15 | 0.03 |
| 1e+6 | 6 | 3 | 18.32 | 0.03 |
| 100000 | 5 | 3 | 21.64 | 0.03 |
| 10000 | 4 | 3 | 24.96 | 0.03 |
| 1000 | 3 | 3 | 28.28 | 0.03 |
標準點（擬合列）
可以切換高級欄（重量/yhat/殘差/杠杆/cooksD）。
| 數量 | log10Q | CT | 重量 | 是的 | 殘差 | 杠杆 | 厨师D |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1e+7 | 7 | 14.97 | 1 | 15 | -0.03 | 0.2 | 0.203125 |
| 1e+7 | 7 | 15 | 1 | 15 | 0 | 0.2 | 0 |
| 1e+7 | 7 | 15.03 | 1 | 15 | 0.03 | 0.2 | 0.203125 |
| 1e+6 | 6 | 18.29 | 1 | 18.32 | -0.03 | 0.1 | 0.080247 |
| 1e+6 | 6 | 18.32 | 1 | 18.32 | 0 | 0.1 | 0 |
未知样品（Ct → 數量）
| 样品 | CT | log10Q_帽子 | 數量_帽子 | DF | 校正數量 |
|---|---|---|---|---|---|
| U1 | 20 | 5.493976 | 311871.654 | 1 | 311871.654 |
| U2 | 23.5 | 4.439759 | 27527.0097 | 1 | 27527.0097 |
標準曲線和殘差
將鼠標懸停在點上可查看詳細資料。
將鼠標懸停在點上可查看詳細資料。
計算步驟（如何計算）
教育工作者須知
- 打開/關閉 OLS/WLS 和截距以比較斜率、殘差和 QC 指南的變化。
- 透過重複測定，每個水準的平均值和標準差有助於討論變異、離群值和權重。
常見問題
什麼是 qPCR 標準曲線？
透過擬合 Ct 與 log10（數量）將標準數量（拷貝數或濃度）與 Ct 關聯起來的曲線。它有助於檢查線性度 (R²) 和擴增效率。
需要多少標準分？
至少需要兩個點才能擬合一條線。對於線性和離群值檢查，建議使用 4-6 個點。
PCR 效率 (%) 是如何計算的？
根據坡度 m：效率 = (10^(-1/m) - 1) × 100。顯示的範圍僅供參考。
-3.32 附近的斜率表明什麼？
對於 10 倍稀釋系列，接近 -3.32 的斜率對應於約 100% 的表觀效率（理想指南）。
效率能超過 100% 嗎？
由於它是根據斜率推斷的，因此由於稀釋誤差或抑制，可能會出現超過 100% 的表觀值。將其作為指南並檢查殘差和標準點。
分享連結 是否包含資料？
僅儲存設定（方法和波段選項）。不包含標準和未知資料。
數量應該使用什麼單位？
任何單位都可以（拷貝數、ng、濃度）。 log10 的數量必須為正。
相關工具
參考文献（注释）
本頁顯示的指南是一般參考。對於研究/教育，請根據需要查閱主要來源。
評論
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