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qPCR 標準化

ΔCt / ΔΔCt 計算器(相對表現量)

貼上 qPCR Ct 值以計算 ΔCt/ΔΔCt 和相對表現量(2^-ΔΔCt)。支援校準品選擇、多個參考基因、Pfaffl 效率校正、圖表、步驟日誌、CSV/LaTeX 和分享連結。

所有計算都在您的瀏覽器中執行;資料不會傳送。僅供研究與教育使用,不用於診斷。

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使用方法(3步)

  1. 貼上資料(組、樣本、Ct_target、Ct_ref)或載入 CSV。對於多個參考,請使用 Ct_ref1、Ct_ref2...
  2. 選擇校準組(或樣本)和彙總方法(平均值/中位數)。如果需要,啟用 Pfaffl 校正。
  3. 按一下計算,即可在表格與圖表中顯示 ΔCt/ΔΔCt、log2FC 與 fold change。分享連結 會保留相同設定。

建議流程

  1. 首先,用標準曲線檢查效率qPCR 標準曲線
  2. 接著,計算 ΔCt / ΔΔCt (本頁)
  3. 如果需要,評估變異或顯著性信賴區間和假設檢定

延伸使用

資料輸入與選項

預設值是範例。選擇預設會立即更新輸入與設定。對於您自己的資料,請貼上並按一下計算。

結果(摘要)

範例資料已預先填入。啟用 JavaScript 後,此摘要會更新為 ΔCt、ΔΔCt、log2FC 與 fold change。

每列結果

組別 樣本 CT_目標 CT_參考 ΔCt ΔΔCt log2FC fold 離群值

離群值不會自動移除;它們顯示為候選值(依據 IQR)。

組別摘要

組別 n log2FC 均值 log2FC SD log2FC SEM 幾何平均數的倍數 fold 算術平均

圖表(log2FC / fold)

計算步驟(如何計算)

    常見問題

    ΔCt 與 ΔΔCt 有什麼差別?

    ΔCt 是同一樣本中目標基因與參考基因 Ct 的差值。ΔΔCt 是相對於校準品的差值。

    2^-ΔΔCt 的假設是什麼?

    它通常假設目標和參考擴增效率相等或相似。如果它們不同,請使用 Pfaffl 校正。

    我應該使用 fold 還是 log2FC?

    log2FC 以 0 為中心,較適合統計與繪圖。fold change 較直觀,但上下調不對稱。

    如何處理多個參考基因?

    提供 Ct_ref1、Ct_ref2 等多個參考值時,會先彙整參考 Ct,再計算 ΔCt。

    我什麼時候應該使用 Pfaffl 效率校正?

    當目標基因與參考基因的擴增效率差異很大時,請考慮 Pfaffl 校正。

    分享連結 是否包含資料?

    僅儲存設定;資料不包含在內。

    參考文獻(註釋)

    本頁上的假設和指南是一般參考。對於研究/教育,請根據需要查閱主要來源。

    評論

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