Cómo utilizar (3 pasos)
- Pegue datos (Grupo, Muestra, Ct objetivo, Ct referencia) o cargue un CSV. Para referencias múltiples, utilice Ct ref1, Ct ref2, ...
- Seleccione un grupo de calibradores (o muestra) y un método de resumen (media/mediana). Habilite la corrección Pfaffl si es necesario.
- Haga clic en Calcular para mostrar ΔCt/ΔΔCt, log2FC y plegar tablas y gráficos. Las URL compartidas mantienen la misma configuración.
Orden recomendado
- Primero, verifique la eficiencia con una curva estándar. → qPCR curva estándar
- A continuación, calcule ΔCt / ΔΔCt (esta página)
- Si es necesario, evalúe la variabilidad o la importancia. → Intervalos de confianza y pruebas de hipótesis.
ir más profundo
- Estadísticas descriptivas
Verificar distribuciones y valores atípicos
- Regresión lineal y correlación
Comprender las curvas estándar
Entrada de datos y opciones
Resultados (resumen)
Los datos de ejemplo ya están cargados. Con JavaScript activado, este resumen se actualiza con ΔCt, ΔΔCt, log2FC y cambio de pliegue.
Resultados por fila
| Fila | grupo | muestra | Ct_objetivo | ct_ref | ΔCt | ΔΔCt | log2FC | doblar | valor atípico |
|---|
Los valores atípicos no se eliminan automáticamente; se muestran como candidatos (basados en IQR).
Resumen del grupo
| grupo | norte | media log2FC | registro2FC SD | log2FC SEM | doblar la media geométrica | multiplicar la media aritmética |
|---|
Gráficos (log2FC/fold)
Pasos de cálculo (Cómo se calcula)
Preguntas frecuentes
¿Cuál es la diferencia entre ΔCt y ΔΔCt?
ΔCt es la diferencia dentro de la muestra entre el objetivo y la referencia. ΔΔCt es la diferencia relativa a un calibrador.
¿Cuál es el supuesto para 2^-ΔΔCt?
Generalmente se supone que las eficiencias de amplificación objetivo y de referencia son iguales o similares. Utilice la corrección Pfaffl si difieren.
¿Debo usar fold o log2FC?
log2FC es simétrico y más fácil para estadísticas y gráficos. Fold es más intuitivo.
¿Cómo se manejan múltiples genes de referencia?
Cuando se proporcionan Ct ref1, Ct ref2, etc., los valores de Ct de referencia se agregan antes de calcular ΔCt.
¿Cuándo debo utilizar la corrección de eficiencia Pfaffl?
Considere la corrección Pfaffl cuando las eficiencias objetivo y de referencia difieran sustancialmente.
¿El recurso compartido URL incluye datos?
Sólo se guardan las configuraciones; los datos no están incluidos.
Herramientas relacionadas
Referencias (notas)
Los supuestos y guías de esta página son referencias generales. Para investigación/educación, consulte fuentes primarias según sea necesario.
Comentarios
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