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Bioquímica Curva estándar

Calculadora de curva estándar de proteínas (BCA / Bradford)

Construye una curva estándar y estima las concentraciones de proteínas de muestras desconocidas. Admite regresión lineal/cuadrática (comparación automática AICc), resta de blanco, réplicas (media ± DE), residuos y exclusión de puntos.

Todos los cálculos se ejecutan en tu navegador; los datos no se envían.

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Ejemplo (preestablecido)

Elige un ejemplo para completar las entradas y ver los resultados de inmediato.

Descripción
—
Cómo utilizar (3 pasos)
  1. Pega estándares (concentración y absorbancia) o importa un archivo CSV/TSV.
  2. Selecciona el ensayo (BCA/Bradford) y ajuste (automático/lineal/cuadrático).
  3. Aparece la curva estándar y las concentraciones desconocidas (se admiten factores de dilución).

Las estimaciones fuera de rango (extrapolación) pueden ser inexactas. Comprueba las advertencias en los resultados. Esta es una herramienta de cálculo y no prescribe optimización experimental.

¿Dudas con el blanco o con el tipo de ajuste?

Esta página sirve para ejecutar el ajuste BCA / Bradford, estimar concentraciones desconocidas y exportar resultados. Si la duda real es si conviene restar el blanco, elegir lineal o cuadrática, o cómo interpretar un valor fuera de rango, abre antes la guía de curvas estándar de ensayos.

Abrir la guía Hub de biología Ver flujo ELISA

Entrada (pegar / CSV)

Ensayo
Resta de blanco (concentración 0)
Media en blanco: —
Ponderación (opcional)
Nota
Si SD está disponible, puede pesar 1/SD² (se recomiendan réplicas).

Estándares

Formato: col 1 = concentración, col 2+ = absorbancia (rep1, rep2,…). TSV/CSV compatible.

Desconocidos

Formato: columna 1 = nombre de la muestra, columna 2+ = absorbancia (se admiten columnas replicadas), última columna opcional: dilution_factor.

Avanzado (exclusión de puntos/residuales/CI)
Exclusión de puntos
Haz clic en puntos estándar en el gráfico para excluir/restaurar (Deshacer disponible)
Puntos excluidos
—

Resultados

Modelo seleccionado
—
Ecuación
—
R²
—
RMSE
—
AICc
—
Comparación (automática)
—

Gráficos

Tabla (estándares)

Concentración Media DE ŷ Residuo Excluido

Tabla (incógnitas)

Muestra Abs. media Conc. medida Factor de dilución Conc. de stock En rango

Nota: Las estimaciones fuera de rango (extrapolación) pueden ser inexactas.

Flujo de trabajo

  1. Introduce los estándares (concentración (x) y absorbancia (y)). Con réplicas, la herramienta calcula la media ± DE.
  2. Opcionalmente, resta la absorbancia media del blanco (concentración 0), aplicada de forma consistente a estándares e incógnitas.
  3. Ajusta con lineal (y=a+bx) o cuadrático (y=a+bx+cx²) y muestra métricas (R²/RMSE/AICc).
  4. Para las incógnitas, recalcula la concentración a partir de la absorbancia y aplica factores de dilución para obtener las concentraciones de stock.

Preguntas frecuentes

¿Cuál es la diferencia entre los ensayos BCA y Bradford?

BCA se basa en la reducción de Cu²⁺ y el complejo BCA; Bradford usa el tinte Coomassie G-250. Ambos estiman proteínas por absorbancia, pero difieren en tolerancia a detergentes, sensibilidad y rango útil.

¿Qué debo ingresar primero?

Introduce los estándares (concentraciones conocidas) y su absorbancia. Si incluyes columnas replicadas, la herramienta calcula la media ± DE automáticamente.

¿Necesito resta de blanco?

A menudo, restar la absorbancia de la concentración 0 (blanco) mejora la estabilidad. Aplica la misma resta de blanco tanto a los estándares como a las incógnitas.

¿Debo utilizar un ajuste lineal o cuadrático?

El ajuste cuadrático puede ser mejor en un rango amplio, mientras que un rango reducido puede funcionar mejor con un ajuste lineal. Usa comparación automática (AICc); si la diferencia es pequeña, suele ser más seguro preferir el modelo lineal más simple.

Mi concentración desconocida está fuera del rango estándar.

Las estimaciones fuera de rango son extrapolaciones y pueden ser inexactas. Considera ajustar los factores de dilución o el rango estándar.

¿Cómo ingreso los factores de dilución?

Puedes ingresar un factor de dilución por fila desconocida. La concentración de stock se calcula como concentración medida × factor de dilución.

¿Puedo utilizar estos resultados en un artículo o informe?

Sí, pero incluye configuraciones clave como el tipo de ajuste (lineal/cuadrático), si se utilizó resta de blanco y si hubo extrapolaciones presentes, para que el análisis sea reproducible.

Interpretación y páginas siguientes

Deja esta página centrada en el ajuste. La guía sirve para decidir si el blanco es defendible, si una cuadrática aporta algo real y cómo redactar el método para que otra persona lo reproduzca.