Contoh (yang telah ditetapkan)
Pilih contoh untuk mengisi masukan dan segera melihat hasilnya.
- Tempel standar (konsentrasi dan serapan) atau impor file CSV/TSV.
- Pilih pengujian (BCA/Bradford) dan kecocokan (otomatis/linier/kuadrat).
- Kurva standar dan konsentrasi yang tidak diketahui muncul (didukung faktor pengenceran).
Estimasi di luar kisaran (ekstrapolasi) bisa jadi tidak akurat. Periksa peringatan di hasil. Ini adalah alat perhitungan dan tidak menentukan optimasi eksperimental.
Masih ragu tentang blanko atau jenis fit yang dipakai?
Gunakan panduan kurva standar assay untuk memutuskan kapan blanko perlu dikurangkan, bagaimana memilih antara linear, kuadrat, 4PL, dan 5PL, serta apa yang perlu ditulis di laporan sebelum konsentrasi akhir dianggap final.
Masukan (tempel / CSV)
Pembobotan (opsional)
Standar
Format: kolom 1 = konsentrasi, kolom 2+ = serapan (rep1, rep2,…). TSV/CSV didukung.
Tidak diketahui
Format: kolom 1 = nama sampel, kolom 2+ = serapan (kolom rep didukung), opsional kolom terakhir: faktor_pengenceran.
Lanjutan (pengecualian poin/sisa/CI)
Hasil
Plot
Tabel (standar)
| Konsentrasi | Berarti | SD | ŷ | Sisa | Dikecualikan |
|---|
Tabel (tidak diketahui)
| Sampel | Berarti Abs | Kesimpulan (diukur) | Faktor pengenceran | Kesimpulan (stok) | Dalam jangkauan |
|---|
Catatan: Estimasi di luar kisaran (ekstrapolasi) bisa jadi tidak akurat.
Alur kerja
- Masukkan standar (konsentrasi x dan serapan y). Dengan ulangan, alat ini menghitung mean±SD.
- Secara opsional, kurangi rata-rata serapan kosong (konsentrasi 0) (diterapkan secara konsisten pada standar dan tidak diketahui).
- Cocokkan dengan linier (y=a+bx) atau kuadrat (y=a+bx+cx²) dan tampilkan metrik (R²/RMSE/AICc).
- Untuk hal yang tidak diketahui, hitung kembali konsentrasi dari serapan dan terapkan faktor pengenceran untuk mendapatkan konsentrasi stok.
FAQ
Apa perbedaan antara tes BCA dan Bradford?
Keduanya memperkirakan konsentrasi protein dari serapan. Bentuk kurva dapat berubah berdasarkan kondisi dan rentang, sehingga alat ini mendukung kesesuaian linier dan kuadrat.
Apa yang harus saya masukkan terlebih dahulu?
Masukkan standar (konsentrasi diketahui) dan serapannya. Jika Anda menyediakan kolom replika, alat akan menghitung rata-rata±SD secara otomatis.
Apakah saya memerlukan pengurangan kosong?
Seringkali, pengurangan konsentrasi 0 (kosong) akan meningkatkan stabilitas. Terapkan pengurangan kosong yang sama pada standar dan tak diketahui.
Haruskah saya menggunakan kecocokan linier atau kuadrat?
Kuadrat mungkin lebih cocok untuk rentang yang luas, sedangkan rentang yang sempit mungkin lebih cocok untuk kecocokan linier. Gunakan perbandingan otomatis (AICc); jika perbedaannya kecil, memilih model linier yang lebih sederhana seringkali lebih aman.
Konsentrasi saya yang tidak diketahui berada di luar kisaran standar.
Estimasi di luar kisaran merupakan ekstrapolasi dan bisa jadi tidak akurat. Pertimbangkan untuk menyesuaikan faktor pengenceran atau kisaran standar.
Bagaimana cara memasukkan faktor pengenceran?
Anda dapat memasukkan faktor pengenceran per baris yang tidak diketahui. Konsentrasi stok dihitung sebagai konsentrasi terukur × faktor pengenceran.
Apakah data saya dikirim ke mana saja?
Tidak. Semua penghitungan dijalankan di browser Anda; data tidak terkirim.
Bisakah saya menggunakan hasil ini dalam makalah atau laporan?
Ya, tetapi sertakan pengaturan utama seperti jenis kecocokan (linier/kuadrat), apakah pengurangan kosong digunakan, dan apakah ada ekstrapolasi, sehingga analisis dapat direproduksi.
Interpretasi dan halaman berikutnya
- Panduan kurva standar assayBaca lagi di sini cara menangani blanko, memilih model, dan menentukan detail apa yang perlu dibawa ke laporan.
- ELISA tukang kurva standar (4PL/5PL)Lanjut ke sini ketika respons mulai sigmoidal dan keputusan antara 4PL dan 5PL lebih penting daripada fit polinomial sederhana.
- Kalkulator konsentrasi & kemurnian A260Periksa dulu konsentrasi dan kemurnian sampel jika kualitas bahan masih meragukan sebelum menyalahkan kurva assay.
- Kalkulator regresi linearGunakan regresi yang lebih sederhana untuk meninjau slope, intercept, dan residu di luar alur lengkap assay.