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生物化學 標準曲線

蛋白質標準曲線計算器

建立標準曲線並估計未知樣品的蛋白質濃度。支援線性/二次迴歸(自動比較AICc)、空白扣除、重複(平均值±SD)、殘差和點排除。

所有計算都在你的瀏覽器中執行;資料未發送。

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範例(預設)

選擇一個範例來填寫輸入並立即查看結果。

描述
使用方法(3步)
  1. 貼上標準品(濃度和吸光度)或匯入 CSV/TSV 文件。
  2. 選擇測定(BCA/Bradford)並擬合(自動/線性/二次)。
  3. 出現標準曲線和未知濃度(支援稀釋因子)。

超出範圍的估計(外推)可能不準確。檢查結果中的警告。這是一個計算工具,不規定實驗優化。

輸入(貼上/CSV)

測定
空白扣除(0濃度)
空白的意思:
加權(可選)
注意事項
如果 SD 可用,你可以按 1/SD² 稱重(建議重複)。

標準

格式:col 1 = 濃度,col 2+ = 吸光度(rep1、rep2、...)。支援 TSV/CSV。

未知樣品

格式:col 1 = 樣品名稱,col 2+ = 吸光度(支援重複列),可選最後一列:稀釋因子。

高級(點排除/殘差/CI)
點排除
單擊繪圖上的標準點以排除/恢復(可撤消)
排除

結果

所選型號
方程
均方根誤差
AICc
比較(自動)

地塊

表(標準)

濃度 平均值 標清 ŷ 殘差 排除

表(未知樣品)

樣品 平均腹肌 濃度(測量值) 稀釋倍數 濃度(stock) 在範圍內

注意:超出範圍的估計(外推)可能不準確。

工作流程

  1. 輸入標準品(濃度 x 和吸光度 y)。通過重複,該工具計算平均值±SD。
  2. 可選擇減去空白(0 濃度)平均吸光度(一致應用於標準品和未知品)。
  3. 擬合線性 (y=a+bx) 或二次 (y=a+bx+cx²) 並顯示指標 (R²/RMSE/AICc)。
  4. 對於未知物,從吸光度反算濃度並應用稀釋因子以獲得stock濃度。

還在猶豫空白處理或擬合類型嗎?

先看測定標準曲線指南,可以把空白扣除、線性/二次與 4PL/5PL 的分工、以及報告裡需要交代的要點理順,再回到這裡做計算。

常見問題

BCA 和 Bradford 檢測有什麼區別?

兩者都根據吸光度估算蛋白質濃度。曲線形狀會根據條件和範圍而變化,因此該工具支援線性和二次擬合。

我應該先輸入什麼?

輸入標準品(已知濃度)及其吸光度。如果你提供重複列,該工具會自動計算平均值±SD。

需要減去空白嗎?

通常,減去 0 濃度(空白)吸光度可以提高穩定性。對標準品和未知品應用相同的空白扣除。

我應該使用線性擬合還是二次擬合?

二次可能在較寬的範圍內擬合得更好,而較窄的範圍則可以通過線性擬合得到很好的結果。使用自動比較(AICc);如果差異很小,則選擇更簡單的線性模型通常更安全。

我的未知濃度超出了標準範圍。

超出範圍的估計是推斷,可能不準確。考慮調整稀釋因子或標準範圍。

如何輸入稀釋因子?

你可以為每個未知行輸入稀釋因子。stock濃度計算為測量濃度×稀釋倍數。

我可以在論文或報告中使用這些結果嗎?

是的,但包括關鍵設定,例如擬合類型(線性/二次)、是否使用空白扣除以及是否存在外推法,因此分析是可重複的。