範例(預設)
選擇一個範例來填寫輸入並立即查看結果。
描述
—
使用方法(3步)
- 貼上標準品(濃度和吸光度)或匯入 CSV/TSV 文件。
- 選擇測定(BCA/Bradford)並擬合(自動/線性/二次)。
- 出現標準曲線和未知濃度(支援稀釋因子)。
超出範圍的估計(外推)可能不準確。檢查結果中的警告。這是一個計算工具,不規定實驗優化。
輸入(貼上/CSV)
測定
空白扣除(0濃度)
空白的意思: —
加權(可選)
注意事項
如果 SD 可用,你可以按 1/SD² 稱重(建議重複)。
標準
格式:col 1 = 濃度,col 2+ = 吸光度(rep1、rep2、...)。支援 TSV/CSV。
未知樣品
格式:col 1 = 樣品名稱,col 2+ = 吸光度(支援重複列),可選最後一列:稀釋因子。
高級(點排除/殘差/CI)
點排除
單擊繪圖上的標準點以排除/恢復(可撤消)
排除
—
結果
所選型號
—
方程
—
R²
—
均方根誤差
—
AICc
—
比較(自動)
—
地塊
表(標準)
| 濃度 | 平均值 | 標清 | ŷ | 殘差 | 排除 |
|---|
表(未知樣品)
| 樣品 | 平均腹肌 | 濃度(測量值) | 稀釋倍數 | 濃度(stock) | 在範圍內 |
|---|
注意:超出範圍的估計(外推)可能不準確。
工作流程
- 輸入標準品(濃度 x 和吸光度 y)。通過重複,該工具計算平均值±SD。
- 可選擇減去空白(0 濃度)平均吸光度(一致應用於標準品和未知品)。
- 擬合線性 (y=a+bx) 或二次 (y=a+bx+cx²) 並顯示指標 (R²/RMSE/AICc)。
- 對於未知物,從吸光度反算濃度並應用稀釋因子以獲得stock濃度。
還在猶豫空白處理或擬合類型嗎?
先看測定標準曲線指南,可以把空白扣除、線性/二次與 4PL/5PL 的分工、以及報告裡需要交代的要點理順,再回到這裡做計算。
常見問題
BCA 和 Bradford 檢測有什麼區別?
兩者都根據吸光度估算蛋白質濃度。曲線形狀會根據條件和範圍而變化,因此該工具支援線性和二次擬合。
我應該先輸入什麼?
輸入標準品(已知濃度)及其吸光度。如果你提供重複列,該工具會自動計算平均值±SD。
需要減去空白嗎?
通常,減去 0 濃度(空白)吸光度可以提高穩定性。對標準品和未知品應用相同的空白扣除。
我應該使用線性擬合還是二次擬合?
二次可能在較寬的範圍內擬合得更好,而較窄的範圍則可以通過線性擬合得到很好的結果。使用自動比較(AICc);如果差異很小,則選擇更簡單的線性模型通常更安全。
我的未知濃度超出了標準範圍。
超出範圍的估計是推斷,可能不準確。考慮調整稀釋因子或標準範圍。
如何輸入稀釋因子?
你可以為每個未知行輸入稀釋因子。stock濃度計算為測量濃度×稀釋倍數。
我可以在論文或報告中使用這些結果嗎?
是的,但包括關鍵設定,例如擬合類型(線性/二次)、是否使用空白扣除以及是否存在外推法,因此分析是可重複的。
解讀與下一步
- 測定標準曲線指南回到這裡複核空白處理、模型選擇,以及報告裡該如何交代實驗判斷。
- ELISA 標準曲線擬合器 (4PL/5PL)當響應明顯轉為 S 形、需要討論 4PL/5PL、加權或外推時,從這裡繼續。
- A260濃度和純度計算器如果懷疑樣品本身的濃度或純度影響了蛋白測定,先在這裡核對基礎質量。
- 線性回歸計算器只想單獨複核斜率、截距和殘差時,用這個更輕量的頁面重新查看。