Exemple (préréglé)
Choisissez un exemple pour remplir les entrées et voir les résultats immédiatement.
- Collez les étalons (concentration et absorbance) ou importez un fichier CSV/TSV.
- Sélectionnez le test (BCA/Bradford) et ajustez (auto/linéaire/quadratique).
- La courbe standard et les concentrations inconnues apparaissent (facteurs de dilution pris en charge).
Les estimations hors plage (extrapolation) peuvent être inexactes. Vérifiez les avertissements dans les résultats. Il s'agit d'un outil de calcul et ne prescrit pas d'optimisation expérimentale.
Vous hésitez sur le blanc ou sur le type d’ajustement ?
Utilisez le guide des courbes standard d’essai pour décider quand soustraire le blanc, comment choisir entre linéaire, quadratique, 4PL et 5PL, et quoi noter dans le rapport avant de figer la concentration finale.
Entrée (coller / CSV)
Pondération (facultatif)
Normes
Format : col 1 = concentration, col 2+ = absorbance (rep1, rep2, …). TSV/CSV pris en charge.
Inconnues
Format : col 1 = nom de l'échantillon, col 2+ = absorbance (colonnes de répétition prises en charge), dernière colonne facultative : dilution_factor.
Avancé (exclusion de points / résidus / CI)
Résultats
Parcelles
Tableau (normes)
| Concentration | Moyenne | SD | ŷ | Résiduel | Exclus |
|---|
Tableau (inconnues)
| Échantillon | Abdos moyens | Conc (mesuré) | Facteur de dilution | Conc. (stock) | À portée |
|---|
Remarque : Les estimations hors plage (extrapolation) peuvent être inexactes.
Flux de travail
- Entrez les normes (concentration x et absorbance y). Avec les répétitions, l'outil calcule la moyenne ± SD.
- Soustrayez éventuellement l’absorbance moyenne du blanc (concentration 0) (appliquée de manière cohérente aux normes et aux inconnues).
- Ajustez avec linéaire (y=a+bx) ou quadratique (y=a+bx+cx²) et affichez les métriques (R²/RMSE/AICc).
- Pour les inconnues, calculez à rebours la concentration à partir de l’absorbance et appliquez des facteurs de dilution pour obtenir les concentrations de stock.
FAQ
Quelle est la différence entre les tests BCA et Bradford ?
Les deux estiment la concentration en protéines à partir de l’absorbance. La forme de la courbe peut changer en fonction des conditions et de la plage. Cet outil prend donc en charge les ajustements linéaires et quadratiques.
Que dois-je saisir en premier ?
Entrez les étalons (concentrations connues) et leur absorbance. Si vous fournissez des colonnes répliquées, l'outil calcule automatiquement la moyenne ± SD.
Ai-je besoin d’une soustraction à blanc ?
Souvent, la soustraction de l’absorbance de concentration 0 (à blanc) améliore la stabilité. Appliquez la même soustraction à blanc aux normes et aux inconnues.
Dois-je utiliser un ajustement linéaire ou quadratique ?
Le quadratique peut mieux s'adapter sur une large plage, tandis qu'une plage rétrécie peut convenir à un ajustement linéaire. Utiliser la comparaison automatique (AICc) ; si la différence est faible, il est souvent plus sûr de préférer le modèle linéaire le plus simple.
Ma concentration inconnue est en dehors de la plage standard.
Les estimations hors plage sont des extrapolations et peuvent être inexactes. Envisagez d'ajuster les facteurs de dilution ou la plage standard.
Comment saisir les facteurs de dilution ?
Vous pouvez saisir un facteur de dilution par ligne inconnue. La concentration du stock est calculée comme étant la concentration mesurée × le facteur de dilution.
Puis-je utiliser ces résultats dans un article ou un rapport ?
Oui, mais incluez des paramètres clés tels que le type d'ajustement (linéaire/quadratique), si la soustraction à blanc a été utilisée et si des extrapolations étaient présentes, afin que l'analyse soit reproductible.
Interprétation et pages suivantes
- Guide des courbes standard d’essaiRelisez ici la gestion du blanc, le choix du modèle et le niveau de détail attendu dans le rapport.
- ELISA ajusteur de courbe standard (4PL/5PL)Passez ici quand la lecture devient sigmoïde et que 4PL/5PL doit être défendu plutôt qu’un simple ajustement polynomial.
- Calculateur de concentration et de pureté A260Vérifiez la concentration et la pureté de l’échantillon avant de conclure que le problème vient de la courbe de dosage.
- Calculateur de régression linéaireUtilisez une régression plus simple pour relire pente, intercept et résidus en dehors du workflow complet du dosage.