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qPCR 迴歸

定量 PCR 標準曲線計算器(效率、R²、未知量)

根據數量(拷貝數或濃度)和 Ct 建立標準曲線,計算斜率、截距、R² 和 PCR 效率 (%)。使用殘差圖、95% 條帶、步驟日誌、CSV/LaTeX 和分享 URL 反算未知量。

所有計算都在您的瀏覽器中运列;資料未傳送。用於研究/教育。

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使用方法(3步)

  1. 貼上標準點(數量、Ct)或載入 CSV 檔案。具有相同數量的列被视為重複測定。
  2. 選擇迴歸方法 (OLS/WLS) 和選項,例如 95% 帶。如果有未知的 Ct 值,請輸入它們。
  3. 按一下計算可查看標準曲線、效率、QC 檢查、未知估計值和步驟日誌。分享 URL 保持相同的設定。

建議流程

  1. 首先,建立標準曲線 (本頁)
  2. 接著,回顾PCR效率(%)跳转到效率
  3. 如果需要,計算相對表現量量 (ΔCt / ΔΔCt)ΔCt / ΔΔCt

延伸使用

資料輸入與選項

預設值是範例。選擇預設會替換標準/未知資料和設定。對於您自己的資料,貼上並按一下計算(或重置)。 跳转至結果

WLS 加权技巧

WLS 适合逐點權重。 1/Q1/Q² 增加低量點的影响力。使用 w 欄設定每個點的權重。

結果(摘要)

PCR 效率 (%)

由斜率 m 計算為 Efficiency = (10^(-1/m) - 1) × 100。顯示的範圍僅供參考。

結果將出現在這里。

範圍是指南。對於研究/教育,一起审查標準點和殘差。

質量檢查(指南)

濃度水準(平均值±標準差)

數量 log10Q n CT_平均值 CT_SD

標準點(擬合列)

可以切換高級欄(重量/yhat/殘差/杠杆/cooksD)。

數量 log10Q CT 重量 是的 殘差 杠杆 厨师D

未知样品(Ct → 數量)

样品 CT log10Q_帽子 數量_帽子 DF 校正數量

標準曲線和殘差

標準曲線(Ct vs log10(數量))
此瀏覽器不支援圖表。結果請參見表格。
將鼠標悬停點可查看详细信息。
殘差 Ct 與預測 Ct
此瀏覽器不支援圖表。結果請參見表格。
將鼠標悬停點可查看详细信息。

計算步驟(如何計算)

    教育工作者須知

    常見问题

    什麼是 qPCR 標準曲線?

    透過擬合 Ct 與 log10(數量)將標準數量(拷貝數或濃度)與 Ct 關聯起來的曲線。它有助於檢查線性度 (R²) 和擴增效率。

    需要多少標準分?

    至少需要兩個點才能擬合一條線。對於線性和離群值檢查,建議使用 4-6 個點。

    PCR 效率 (%) 是如何計算的?

    根據坡度 m:效率 = (10^(-1/m) - 1) × 100。顯示的範圍僅供參考。

    -3.32 附近的斜率表明什麼?

    對於 10 倍稀釋系列,接近 -3.32 的斜率對應於約 100% 的表觀效率(理想指南)。

    效率能超過 100% 嗎?

    由於它是根據斜率推断的,因此由於稀釋誤差或抑制,可能会出現超過 100% 的表觀值。將其作為指南並檢查殘差和標準點。

    分享 URL 是否包含資料?

    僅儲存設定(方法和波段選項)。不包含標準和未知資料。

    數量應該使用什麼單位?

    任何單位都可以(拷貝數、ng、濃度)。 log10 的數量必須為正。

    參考文献(注释)

    本頁顯示的指南是一般參考。對於研究/教育,請根據需要查閱主要來源。

    評論

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