कैसे उपयोग करें (3 चरण)
- मानक बिंदु (मात्रा, सीटी) चिपकाएँ या CSV फ़ाइल लोड करें। समान मात्रा वाली पंक्तियों को प्रतिकृति के रूप में माना जाता है।
- एक प्रतिगमन विधि चुनें, जैसे ओएलएस या डब्ल्यूएलएस। जरूरत हो तो 95% बैंड जैसे विकल्प भी सेट करें। यदि आपके पास अज्ञात सीटी मान हैं, तो उन्हें भी दर्ज करें।
- मानक वक्र, दक्षता, QC जांच, अज्ञात अनुमान और चरण लॉग देखने के लिए गणना पर क्लिक करें। शेयर URL में यही सेटिंग्स बनी रहती हैं।
अनुशंसित आदेश
- सबसे पहले, एक मानक वक्र बनाएँ (यह पेज)
- इसके बाद, PCR दक्षता (%) की समीक्षा करें → दक्षता की ओर बढ़ें
- यदि आवश्यक हो, सापेक्ष अभिव्यक्ति की गणना करें (ΔCt / ΔΔCt) → ΔCt / ΔΔCt
और गहराई में जाएँ
- रैखिक प्रतिगमन और सहसंबंध
अवशिष्ट और 95% बैंड कैसे पढ़ें
- वर्णनात्मक आँकड़े
प्रतिकृति परिवर्तनशीलता की जाँच करें
डेटा इनपुट और विकल्प
परिणाम (सारांश)
PCR दक्षता (%)
ढलान एम से गणना की गई Efficiency = (10^(-1/m) - 1) × 100. दिखाई गई सीमा एक मार्गदर्शिका है.
प्रारंभिक परिणाम उदाहरण मानक वक्र का उपयोग करते हैं; अपना डेटा चिपकाकर गणना करें।
| n (बिंदु) | 15 |
|---|---|
| k (स्तर) | 5 |
| ढाल m | -3.32 |
| अवरोध b | 38.24 |
| R² | 1 |
| दक्षता (%) | 100.1 |
रेंज मार्गदर्शक हैं. शोध/शिक्षा के लिए मानक बिंदुओं और अवशेषों की एक साथ समीक्षा करें।
गुणवत्ता जांच (गाइड)
एकाग्रता स्तर (मतलब ± एसडी)
| मात्रा | लॉग10Q | एन | सीटी_मीन | सीटी_एसडी |
|---|---|---|---|---|
| 1e+7 | 7 | 3 | 15 | 0.03 |
| 1e+6 | 6 | 3 | 18.32 | 0.03 |
| 100000 | 5 | 3 | 21.64 | 0.03 |
| 10000 | 4 | 3 | 24.96 | 0.03 |
| 1000 | 3 | 3 | 28.28 | 0.03 |
मानक बिंदु (पंक्तियाँ फ़िट करें)
उन्नत कॉलम (वजन / yhat / अवशिष्ट / उत्तोलन / कुकडी) को टॉगल किया जा सकता है।
| मात्रा | लॉग10Q | सी.टी | वजन | हाँ | अवशिष्ट | उत्तोलन | रसोइयाD |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1e+7 | 7 | 14.97 | 1 | 15 | -0.03 | 0.2 | 0.203125 |
| 1e+7 | 7 | 15 | 1 | 15 | 0 | 0.2 | 0 |
| 1e+7 | 7 | 15.03 | 1 | 15 | 0.03 | 0.2 | 0.203125 |
| 1e+6 | 6 | 18.29 | 1 | 18.32 | -0.03 | 0.1 | 0.080247 |
| 1e+6 | 6 | 18.32 | 1 | 18.32 | 0 | 0.1 | 0 |
अज्ञात नमूने (सीटी → मात्रा)
| नमूना | सी.टी | log10Q_hat | मात्रा_टोपी | डीएफ | मात्रा_संशोधित |
|---|---|---|---|---|---|
| U1 | 20 | 5.493976 | 311871.654 | 1 | 311871.654 |
| U2 | 23.5 | 4.439759 | 27527.0097 | 1 | 27527.0097 |
मानक वक्र और अवशेष
गणना चरण (इसकी गणना कैसे की जाती है)
शिक्षकों के लिए नोट्स
- ढलान, अवशेष और क्यूसी गाइड कैसे बदलते हैं इसकी तुलना करने के लिए ओएलएस/डब्ल्यूएलएस स्विच करें और इंटरसेप्ट को चालू/बंद करें।
- प्रतिकृति के साथ, प्रति स्तर माध्य और एसडी परिवर्तनशीलता, आउटलेयर और भार पर चर्चा करने में मदद करते हैं।
सामान्य प्रश्न
qPCR मानक वक्र क्या है?
एक वक्र जो Ct बनाम log10(मात्रा) को फिट करके मानक मात्रा (कॉपी संख्या या एकाग्रता) को Ct से जोड़ता है। यह रैखिकता (आर²) और प्रवर्धन दक्षता की जांच करने में मदद करता है।
कितने मानक अंक आवश्यक हैं?
एक पंक्ति में फिट होने के लिए कम से कम दो बिंदुओं की आवश्यकता होती है। रैखिकता और बाहरी जांच के लिए, 4-6 अंक की सिफारिश की जाती है।
PCR दक्षता (%) की गणना कैसे की जाती है?
ढलान m से: दक्षता = (10^(-1/m) - 1) × 100। प्रदर्शित सीमा एक मार्गदर्शक है।
-3.32 के आसपास ढलान क्या दर्शाता है?
10× कमजोर पड़ने वाली श्रृंखला के लिए, -3.32 के करीब एक ढलान लगभग 100% (आदर्श गाइड) की स्पष्ट दक्षता से मेल खाती है।
क्या दक्षता 100% से अधिक हो सकती है?
क्योंकि यह ढलान से अनुमान लगाया गया है, 100% से अधिक स्पष्ट मान कमजोर पड़ने की त्रुटि या अवरोध के कारण हो सकते हैं। इसे एक मार्गदर्शक के रूप में मानें और अवशेषों और मानक बिंदुओं की जांच करें।
क्या शेयर URL में डेटा शामिल है?
केवल सेटिंग्स (तरीके और बैंड विकल्प) सहेजे गए हैं। मानक और अज्ञात डेटा शामिल नहीं हैं.
मुझे मात्रा के लिए किस इकाई का उपयोग करना चाहिए?
कोई भी इकाई ठीक है (कॉपी संख्या, एनजी, एकाग्रता)। लॉग10 के लिए मात्रा सकारात्मक होनी चाहिए।
संबंधित उपकरण
सन्दर्भ (नोट्स)
इस पृष्ठ पर दिखाई गई मार्गदर्शिकाएँ सामान्य संदर्भ हैं। अनुसंधान/शिक्षा के लिए आवश्यकतानुसार प्राथमिक स्रोतों से परामर्श लें।
टिप्पणियाँ
प्रश्न या सुधार साझा करें (बटन पर क्लिक करने के बाद टिप्पणियाँ लोड होती हैं)।