Como usar (3 passos)
- Selecione um exemplo ou cole padrões (concentração e sinal).
- Escolha 4PL/5PL, ponderação e outras configurações.
- A curva e as concentrações desconhecidas aparecem (a extrapolação é sinalizada).
Este é um modelo. Extrapolações fora da faixa padrão podem ser imprecisas. Use subtração em branco somente quando necessário.
Ainda em dúvida sobre branco, ponderação ou escolha entre 4PL e 5PL?
O guia de curvas padrão de ensaio ajuda a decidir quando corrigir o branco, como interpretar extrapolação e quando um 5PL realmente acrescenta algo em relação a um 4PL mais simples.
Entradas (padrões, incógnitas, configurações)
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Opções de exibição
Colunas mínimas: concentration e signal. Várias linhas com a mesma concentração são tratadas como réplicas.
Colunas mínimas: sample e signal. Se diluição_fator estiver em branco, será tratado como 1.
Resultados (curva e concentrações)
R² e AIC são guias. Verifique também os resíduos e se os valores são extrapolados.
Curva padrão
Gráfico residual (opcional)
Parâmetros (A, B, C, D, G)
| parâmetro | valor | IC 95% (aproximadamente) |
|---|
Guia: A=Inferior (baixa concentração), D=Topo (alta), C=EC50 (ponto médio), B=Hill inclinação, G=assimetria (somente 5PL). Internamente calculamos (x/C)^B como exp(B·ln(x/C)). Log10 no eixo x é para facilitar a leitura.
CQ (cálculo retroativo/recuperação)
| rótulo | conc_nominal | sinal_média | conc_hat | recuperação |
|---|
Incógnitas (y → concentração)
| amostra | sinal_média | DF | conc_medida | conc_original | bandeira |
|---|
Como é calculado
- Ajuste uma curva logística 4PL/5PL com mínimos quadrados não lineares.
- Concentrações desconhecidas são calculadas invertendo a curva ajustada.
- A ponderação (1/a, 1/a², etc.) pode ajudar a lidar com a variação entre faixas de concentração.
Os valores são guias. Verifique também valores discrepantes, intervalos padrão e condições de diluição.
Perguntas frequentes
Devo usar 4PL ou 5PL?
4PL geralmente é suficiente. Use 5PL se for necessária assimetria (compare com AIC, etc.).
Preciso de ponderação (1/a, 1/a²)?
Não é obrigatório. Comece sem ponderação e experimente se aparecer tendência em toda a faixa.
Como devo lidar com a concentração 0 (em branco)?
Por padrão, os espaços em branco são excluídos do ajuste (funciona bem com log x). Use subtração em branco somente se necessário.
Um valor desconhecido está fora do intervalo padrão.
Será mostrado como extrapolado. A precisão cai, então dilua e meça novamente dentro do alcance.
Interpretação e próximas páginas
- Guia de curvas padrão de ensaio
Revise aqui a lógica do branco, a comparação 4PL/5PL e o quanto confiar em um resultado extrapolado.
- Calculadora de curva padrão de proteína (BCA / Bradford)
Compare com um fluxo de proteína quando precisar voltar para uma curva mais estreita e menos sigmoidal.
- Calculadora de concentração e pureza A260
Confira a qualidade da amostra antes de culpar o modelo ELISA por um comportamento instável.
- Calculadora de regressão linear
Releia inclinação, intercepto e resíduos em uma página mais simples antes do ajuste logístico completo.
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