使用方法(3步)
- 選擇一個範例或輸入載體長度 (bp) 和插入長度 (bp)。
- 輸入目標莫耳比(例如 1:3)和載體質量 (ng)。
- 顯示所需的插入片段質量 (ng) 和體積 (μL)(如果提供濃度)。
這是一個數量計算器。最佳比率取決於末端類型和條件;遵循您的協議。
輸入(載體/插入)
結果
插入片段質量 (ng)
—
插入片段體積 (µL)
—
載體體積 (µL)
—
總 DNA 質量 (ng)
—
總 DNA 體積 (µL)
—
| DNA | 長度(bp) | 質量(納克) | 濃度(納克/微升) | 體積(微升) | pmol(指南) |
|---|
共享 URL 可以恢復您的輸入(固定英文鍵)。
該工具僅計算金額。它並不能保證成功。
計算方法
- 作為 dsDNA 近似值, pmol =(質量ng×1000)/(bp×660).
- 根據載體質量和長度計算載體 pmol。
- 代入目標 pmol = 載體 pmol × 目標比率,然後轉換回質量 (ng)。
- 如果濃度已知,則體積=質量/濃度。
價值觀是指導。請遵循您的最終條件協議。
常見問題
為什麼使用莫耳比?
不同長度的片段在相同質量下具有不同的分子數。莫耳比使分子計數保持一致。
常用的比例有哪些?
載體:插入片段比率如 1:3 或 1:5 是常見的起點。最佳比率取決於目的和條件。
我應該使用哪個載體長度?
使用用於接合的線性化載體片段的實際長度,通常是完整質體長度。
我不知道插入濃度。
您仍然可以計算所需的質量 (ng)。僅當提供濃度時才顯示體積 (μL)。
我的體積非常小(例如 0.1 µL)。
非常小的體積很容易出錯。考慮中間稀釋或調整載體質量和反應體積。
這些金額能保證成功嗎?
不可以。該工具僅計算金額。成功取決於末端類型、反應條件和 DNA 質量。