使用方法（3步）
- 選擇一個範例或輸入主鏈和插入片段的片段長度 (bp) 和濃度 (ng/μL)。
- 選擇莫耳比（例如，插入 2×）和主鏈量（pmol 或 ng）。
- 將顯示所需的質量 (ng) 和體積 (μL)，以及配方（主混合物/試劑和剩餘的水）。
這是一個數量計算器。推薦的條件因試劑組和方案而異，因此請遵循您的方案。 Golden Gate 試劑預設僅作為計算範例。
輸入（片段表）
結果
剩餘水量 (µL)
—
總 DNA 體積 (µL)
—
總 DNA 質量 (ng)
—
2× 主混音 體積（微升）
—
| 片段 | 角色 | 長度（bp） | 目標（pmol） | 質量（納克） | 體積（微升） | 注意事項 |
|---|
共享 URL 可以恢復您的輸入（固定英文鍵）。
該工具僅計算金額。它並不能保證成功。
計算方法
- 作為 dsDNA 近似值， pmol =（質量ng×1000）/（bp×660）.
- 設置骨架片段量（pmol 為 Gibson，ng 為 Golden Gate）並計算骨架片段 pmol。
- 每個插入目標是 insert_target_pmol =backbone_pmol × 比率，然後轉換為質量 (ng)。
- 如果濃度 (ng/µL) 已知， 體積=質量/濃度 給出體積 (μL)。
- 剩餘水的計算方法是總反應體積減去主混合物/試劑和 DNA 體積。
價值觀是指導。按照您的試劑組/方案瞭解最終條件。
常見問題
Gibson 和 Golden Gate 有什麼區別？
兩者都組裝 DNA 片段，但反應機制和酶不同。該工具計算要混合多少 DNA。
為什麼使用莫耳比？
不同長度的片段在相同質量下具有不同的分子數。莫耳比使分子計數保持一致。
常用的比例有哪些？
根據經驗，插入片段通常是骨架片段的 2 倍或 3 倍。這取決於組裝，應該進行測試。
我可以在沒有濃度值的情況下使用它嗎？
是的。您仍然可以計算所需的質量 (ng)。僅當提供濃度時才會顯示體積 (μL)。
我的體積非常小（例如 0.1 µL）。
非常小的體積很容易出錯。考慮中間稀釋或調整骨架量和反應體積。
我可以按原樣使用 Golden Gate 試劑預設嗎？
試劑量取決於試劑組和方案。預設僅作為計算範例；遵循您的實驗流程。
這些金額能保證成功嗎？
不可以。該工具僅計算金額。成功取決於設計、DNA 質量和反應條件。