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PCR 分子生物學

PCR 預混計算器:反應、最終濃度、超量

根據反應體積/計數和stock/最終濃度計算 PCR/qPCR 主混合液液體積。支援超量(% 或 +1)、96/384 孔和複製就緒協議文本。

所有計算都在你的瀏覽器中執行。沒有發送任何資料。

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使用方法(3步)

  1. 選擇一個範例或輸入反應體積和反應計數(或 96/384 孔板)。
  2. 設定超量(例如 10%)和成分(2× 混合物、引物等)。
  3. 顯示每次反應體積、超量總量和移液方案。

該工具僅計算體積。分別優化條件。

輸入

反應設定

通常單獨添加模板以降低汙染風險和樣品間偏差。

組件(快速模式)

水被計算為達到反應體積的剩餘體積。

結果

反應(孔)
準備好的反應(包括超量)
反應體積
每孔分配(預混)
總預混體積

成分表

組件 每個反應 (μL) 總計(微升) 註釋

表格水平滾動。

“單獨”表示通常在主混合液液之外添加的組分(例如模板)。

協議(複製就緒)
分享 URL / 匯出

分享 URL 包含輸入(包括組件)並且可能很長。

計算方法

該工具僅計算體積;它並不能保證實驗成功。

常見問題

什麼是主混音?

主混合液液是為多個反應準備的常見試劑混合物。它減少了移液步驟和變異性。

我應該添加多少超量?

典型的指導是 5–10% 或 +1 反應。根據移液和反應計數進行調整。

如何輸入 2×(或 5×)主混音?

輸入倍數濃度。對於 2× 混合達到 1× 最終,體積約為反應體積的一半(自動計算)。

模板是否應該包含在主混音中?

通常,模板是單獨添加的,以降低汙染風險和樣品間偏差。該工具預設為單獨添加(可切換)。

水的體積為什麼是負值?

組分總量超過反應體積。增加反應體積或減少組分體積(尤其是模板)。

我得到的體積非常小(例如 0.1 µL)。

這樣的體積很難移液。考慮中間稀釋或調整反應體積。

我可以將其用於 qPCR 嗎?

是的。輸入 2× qPCR 混合物和引物濃度以計算總體積。

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