使用方法(3步)
- 選擇一個範例或輸入反應體積和反應計數(或 96/384 孔板)。
- 設定超量(例如 10%)和成分(2× 混合物、引物等)。
- 顯示每次反應體積、超量總量和移液方案。
該工具僅計算體積。分別優化條件。
輸入
結果
反應(孔)
—
準備好的反應(包括超量)
—
反應體積
—
每孔分配(預混)
—
總預混體積
—
成分表
| 組件 | 每個反應 (μL) | 總計(微升) | 註釋 |
|---|
表格水平滾動。
「單獨」表示通常在主混合液之外加入的組分(例如模板)。
實驗流程(可直接複製)
—
分享 URL / 匯出
分享 URL 包含輸入(包括組件)並且可能很長。
計算方法
- 從濃度到體積:使用C1V1=C2V2,V1 = (C_final / C_stock) × Vtotal。
- 倍數濃度(2×/5×):V = (final_x / stock_x) × Vtotal(通常最終 = 1×)。
- 超量:百分比無條件進位 (ceil),準備 = ceil(孔 × (1 + pct/100))。
- 水(注滿):水 = Vtotal − ΣV(分量)。負數表示有錯誤。
- 總計:主混合液中包含的組分使用製備的計數;單獨的組件使用孔計數(可切換)。
該工具僅計算體積;它並不能保證實驗成功。
常見問題
什麼是主混合液?
主混合液是為多個反應預先準備的常見試劑混合物。它可減少移液步驟和變異。
我應該預留多少超量?
典型的指導是 5–10% 或 +1 反應。根據移液和反應計數進行調整。
如何輸入 2×(或 5×)主混合液?
輸入倍數濃度。對於 2× 混合達到 1× 最終,體積約為反應體積的一半(自動計算)。
模板是否應該包含在主混合液中?
通常,模板會單獨加入,以降低汙染風險和樣品間偏差。該工具預設為單獨加入(可切換)。
水的體積為什麼是負值?
組分總量超過反應體積。增加反應體積或減少組分體積(尤其是模板)。
我得到的體積非常小(例如 0.1 µL)。
這樣的體積很難移液。考慮中間稀釋或調整反應體積。
我可以將其用於 qPCR 嗎?
是的。輸入 2× qPCR 混合物和引物濃度以計算總體積。
相關工具
- 退火溫度指南 → 引物 Tm 計算器
- 核酸濃度換算 → DNA/RNA 濃度換算 → qPCR 標準曲線
- 瀏覽生物學工具 → 生物學計算器
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