कैसे उपयोग करें (3 चरण)
- एक उदाहरण चुनें या प्रतिक्रिया मात्रा और प्रतिक्रिया गणना (या 96/384 वेल प्लेट) दर्ज करें।
- ओवरएज (जैसे, 10%) और घटक (2× मिश्रण, प्राइमर, आदि) सेट करें।
- पहले प्रति-प्रतिक्रिया मात्रा दिखती है। फिर ओवरएज सहित कुल योग और पिपेटिंग प्रोटोकॉल मिलता है।
यह टूल केवल वॉल्यूम की गणना करता है। स्थितियों को अलग से अनुकूलित करें.
इनपुट
परिणाम
घटक तालिका
| घटक | प्रति प्रतिक्रिया (μL) | कुल (µL) | टिप्पणियाँ |
|---|
तालिका क्षैतिज रूप से स्क्रॉल होती है.
"पृथक" उन घटकों के लिए है जो मास्टर मिश्रण से बाहर जोड़े जाते हैं। उदाहरण: टेम्पलेट।
प्रोटोकॉल (कॉपी-तैयार)
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शेयर यूआरएल में इनपुट (घटकों सहित) शामिल हैं और ये लंबे हो सकते हैं।
इसकी गणना कैसे की जाती है
- एकाग्रता से आयतन: C1V1=C2V2 से V1 = (C_final / C_stock) × Vtotal निकाला जाता है।
- स्टॉक 2×/5×: V = (अंतिम_x / स्टॉक_x) × Vकुल। अक्सर अंतिम मान 1× रखा जाता है।
- ओवरएज: प्रतिशत जोड़कर तैयार रिएक्शन संख्या ऊपर की ओर पूर्णांकित की जाती है।
- पानी: जल = कुल - ΣV(घटक)। नकारात्मक मान त्रुटि दिखाता है।
- कुल: मास्टर मिक्स वाले घटक तैयार गिनती लेते हैं। अलग घटक वेल्स गिनती ले सकते हैं।
यह उपकरण केवल वॉल्यूम की गणना करता है; यह प्रयोगात्मक सफलता की गारंटी नहीं देता.
सामान्य प्रश्न
मास्टर मिक्स क्या है?
मास्टर मिश्रण कई प्रतिक्रियाओं के लिए एक साथ तैयार किया गया अभिकर्मक मिश्रण है।
इससे पिपेटिंग चरण और बदलाव कम होते हैं।
मुझे कितना ओवरएज जोड़ना चाहिए?
एक सामान्य मार्गदर्शिका 5-10% या +1 प्रतिक्रिया है। पिपेटिंग और प्रतिक्रिया गणना के आधार पर समायोजित करें।
मैं 2× (या 5×) मास्टर मिक्स कैसे दर्ज करूं?
इसे एक गुना एकाग्रता के रूप में दर्ज करें। 2× मिश्रण को 1× अंतिम तक पहुँचाने पर मात्रा प्रतिक्रिया मात्रा का लगभग आधा होती है।
यह गणना अपने-आप हो जाती है।
क्या टेम्पलेट को मास्टर मिक्स में शामिल किया जाना चाहिए?
टेम्पलेट को अक्सर अलग जोड़ा जाता है।
इससे संदूषण और नमूना-से-नमूना फर्क कम होता है।
यह टूल डिफॉल्ट रूप से उसे अलग रखता है। जरूरत हो तो टॉगल बदलें।
जल का आयतन ऋणात्मक क्यों है?
घटकों का योग प्रतिक्रिया मात्रा से अधिक है। प्रतिक्रिया की मात्रा बढ़ाएँ या घटक की मात्रा कम करें (विशेषकर टेम्पलेट)।
मुझे बहुत छोटी मात्रा मिली (जैसे, 0.1 μL)।
ऐसी मात्राओं को पिपेट करना कठिन होता है। मध्यवर्ती तनुकरण या प्रतिक्रिया मात्रा को समायोजित करने पर विचार करें।
क्या मैं इसका उपयोग qPCR के लिए कर सकता हूँ?
हाँ. कुल मात्रा की गणना करने के लिए 2× qPCR मिश्रण और प्राइमर सांद्रता दर्ज करें।
संबंधित उपकरण
- एनीलिंग तापमान गाइड → प्राइमर टीएम कैलकुलेटर
- क्लोनिंग मिश्रण की मात्रा → बंधाव दाढ़ अनुपात → DNA असेंबली मिश्रण
- जीवविज्ञान उपकरण ब्राउज़ करें → जीवविज्ञान कैलकुलेटर
प्रतिक्रिया
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