कैसे उपयोग करें (3 चरण)
- एक उदाहरण चुनें या वेक्टर लंबाई (बीपी) दर्ज करें और लंबाई (बीपी) डालें।
- लक्ष्य दाढ़ अनुपात (जैसे, 1:3) और वेक्टर द्रव्यमान (एनजी) दर्ज करें।
- आवश्यक सम्मिलित द्रव्यमान (एनजी) और आयतन (μL) दिखाए गए हैं (यदि एकाग्रता प्रदान की गई है)।
यह एक मात्रा कैलकुलेटर है. इष्टतम अनुपात अंतिम प्रकार और स्थितियों पर निर्भर करते हैं; अपने प्रोटोकॉल का पालन करें.
इनपुट (वेक्टर/इन्सर्ट)
परिणाम
आवश्यक इन्सर्ट मात्रा
— ng
आवश्यक इन्सर्ट आयतन (यदि सांद्रता दी गई हो)
— µL
आवश्यक वेक्टर आयतन (यदि सांद्रता दी गई हो)
— µL
मोल (मार्गदर्शक)
—
लक्ष्य अनुपात (इन्सर्ट/वेक्टर)
—
DNA उप-योग
— ng / — µL
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सामान्य अनुपातों की तुलना (वैकल्पिक)
| अनुपात (वेक्टर:इन्सर्ट) | इन्सर्ट amount (ng) | इन्सर्ट volume (µL) |
|---|
यह टूल केवल मात्राओं की गणना करता है। यह सफलता की गारंटी नहीं देता।
इसकी गणना कैसे की जाती है
- एक dsDNA सन्निकटन के रूप में, pmol = (द्रव्यमान_एनजी × 1000) / (बीपी × 660).
- वेक्टर द्रव्यमान और लंबाई से वेक्टर pmol की गणना करें।
- लक्ष्य pmol = वेक्टर pmol × लक्ष्य अनुपात डालें, फिर वापस द्रव्यमान (ng) में परिवर्तित करें।
- यदि सांद्रता ज्ञात हो, तो आयतन = द्रव्यमान/सांद्रता।
मूल्य मार्गदर्शक होते हैं। अंतिम स्थितियों के लिए अपने प्रोटोकॉल का पालन करें।
सामान्य प्रश्न
दाढ़ अनुपात का उपयोग क्यों करें?
अलग-अलग लंबाई के टुकड़ों में एक ही द्रव्यमान पर अलग-अलग अणु संख्या होती है। मोलर अनुपात अणुओं की संख्या को सुसंगत रखता है।
आमतौर पर कौन से अनुपात का उपयोग किया जाता है?
वेक्टर: 1:3 या 1:5 जैसे अनुपात सम्मिलित करना सामान्य प्रारंभिक बिंदु हैं। इष्टतम अनुपात अंत और स्थितियों पर निर्भर करते हैं।
मुझे किस वेक्टर लंबाई का उपयोग करना चाहिए?
बंधाव के लिए उपयोग किए जाने वाले रेखीयकृत वेक्टर टुकड़े की वास्तविक लंबाई का उपयोग करें, अक्सर पूर्ण प्लास्मिड लंबाई।
मैं सम्मिलित एकाग्रता नहीं जानता.
आप अभी भी आवश्यक द्रव्यमान (एनजी) की गणना कर सकते हैं। आयतन (μL) केवल तभी दिखाया जाता है जब एकाग्रता प्रदान की जाती है।
मेरे वॉल्यूम बेहद छोटे हैं (उदाहरण के लिए, 0.1 μL)।
बहुत छोटी मात्राएँ त्रुटि-प्रवण होती हैं। मध्यवर्ती तनुकरण पर विचार करें या वेक्टर द्रव्यमान और प्रतिक्रिया मात्रा को समायोजित करें।
क्या ये राशियाँ सफलता की गारंटी देंगी?
नहीं, यह उपकरण केवल राशियों की गणना करता है। सफलता अंतिम प्रकार, प्रतिक्रिया की स्थिति और DNA गुणवत्ता पर निर्भर करती है।