← 計算器

分子生物學 克隆

接合摩爾比計算器(載體:插入片段)

根據載體質量和長度加上目標摩爾比(例如 1:3)計算所需的插入片段質量 (ng)。如果濃度已知,還會顯示所需體積 (μL)。

所有計算都在您的瀏覽器中執行。沒有發送任何資料。

其他語言 日本語 | English | 简体中文 | 繁體中文 | 繁體中文(香港) | Español | Português (Brasil) | Bahasa Indonesia | Français | हिन्दी | العربية

使用方法(3步)

  1. 選擇一個範例或輸入載體長度 (bp) 和插入長度 (bp)。
  2. 輸入目標摩爾比(例如 1:3)和載體質量 (ng)。
  3. 顯示所需的插入片段質量 (ng) 和體積 (μL)(如果提供濃度)。

這是一個數量計算器。最佳比率取決於末端類型和條件;遵循您的協議。

輸入(載體/插入片段)

—

自訂比例
濃度(選填:填入後顯示所需體積 µL)
進階設定

dsDNA 預設參考值為 660 g/mol/bp。計算插入片段用量時,此係數大致會抵消,結果主要由 bp 比與質量決定。

結果

所需插入片段用量
— ng
所需插入片段體積(已提供濃度時)
— µL
所需載體體積(已提供濃度時)
— µL
摩爾量(參考)
—
目標比例(插入片段/載體)
—
DNA 小計
— ng / — µL
分享連結可在此頁面還原輸入值。
比較常用比例(選填)
比例(載體:插入片段) 插入片段用量(ng) 插入片段體積(µL)

此工具只計算用量,無法保證實驗成功。

計算方法

  1. 作為 dsDNA 近似值, pmol =(質量ng×1000)/(bp×660).
  2. 根據載體質量和長度計算載體 pmol。
  3. 代入目標 pmol = 載體 pmol × 目標比率,然後轉換回質量 (ng)。
  4. 如果濃度已知,則體積=質量/濃度。

價值觀是指導。請遵循您的最終條件協議。

常見問題

為什麼使用摩爾比?
不同長度的片段在相同質量下具有不同的分子數。摩爾比使分子計數保持一致。
常用的比例有哪些?
載體:插入片段比率如 1:3 或 1:5 是常見的起點。最佳比率取決於目的和條件。
我應該使用哪個載體長度?
使用用於接合的線性化載體片段的實際長度,通常是完整質體長度。
我不知道插入濃度。
您仍然可以計算所需的質量 (ng)。僅當提供濃度時才顯示體積 (μL)。
我的體積非常小(例如 0.1 µL)。
非常小的體積很容易出錯。考慮中間稀釋或調整載體質量和反應體積。
這些金額能保證成功嗎?
不可以。該工具僅計算金額。成功取決於末端類型、反應條件和 DNA 質量。