Cómo utilizar (3 pasos)
- Elige un ejemplo o ingresa el volumen de reacción y el recuento de reacciones (o placa de 96/384 pocillos).
- Establece el excedente (por ejemplo, 10%) y los componentes (mezcla 2×, cebadores, etc.).
- Se muestran los volúmenes por reacción, los totales con exceso y un protocolo de pipeteo.
Esta herramienta calcula volúmenes únicamente. Optimiza las condiciones por separado.
Entradas
Resultados
tabla de componentes
| Componente | Por reacción (μL) | Total (μl) | Notas |
|---|
La tabla se desplaza horizontalmente.
“Separado” indica componentes que normalmente se agregan fuera de la mezcla maestra (por ejemplo, plantilla).
Protocolo (listo para copiar)
—
Compartir URL / Exportar
Las URL compartidas incluyen entradas (incluidos componentes) y pueden ser largas.
Cómo se calcula
- De la concentración al volumen: Usando C1V1=C2V2, V1 = (C_final / C_stock) × Vtotal.
- Concentración relativa (2×/5×): V = (final_x / stock_x) × Vtotal (normalmente final = 1×).
- Excedente: El porcentaje se redondea hacia arriba (techo), preparado = techo (pocillos × (1 + pct/100)).
- Agua (llenado): Agua = Vtotal − ΣV(componente). Negativo significa un error.
- Totales: Los componentes incluidos en la mezcla maestra utilizan la cantidad preparada; los componentes separados utilizan el recuento de pocillos (conmutable).
Esta herramienta calcula volúmenes únicamente; no garantiza el éxito experimental.
Preguntas frecuentes
¿Qué es una mezcla maestra?
Una mezcla maestra es una mezcla de reactivos común preparada para múltiples reacciones. Reduce los pasos de pipeteo y la variabilidad.
¿Cuánto excedente debo agregar?
Una guía típica es del 5 al 10 % o +1 de reacción. Ajusta según el pipeteo y el recuento de reacciones.
¿Cómo ingreso una mezcla maestra 2× (o 5×)?
Introdúcela como concentración relativa. Para que una mezcla 2× llegue a 1× final, el volumen es aproximadamente la mitad del volumen de reacción (calculado automáticamente).
¿Debería incluirse la plantilla en la mezcla maestra?
A menudo, la plantilla se agrega por separado para reducir el riesgo de contaminación y el sesgo entre muestras. Esta herramienta tiene como valor predeterminado la suma separada (conmutable).
¿Por qué el volumen de agua es negativo?
Los totales de los componentes exceden el volumen de reacción. Aumenta el volumen de reacción o reduce los volúmenes de los componentes (especialmente la plantilla).
Obtuve un volumen muy pequeño (por ejemplo, 0,1 µL).
Estos volúmenes son difíciles de pipetear. Considera una dilución intermedia o ajusta el volumen de reacción.
¿Puedo usar esto para qPCR?
Sí. Introduce una mezcla 2× qPCR y concentraciones de cebador para calcular los volúmenes totales.
Herramientas relacionadas
- Guía de temperatura de recocido → Calculadora de Tm de cebadores
- Volúmenes de mezcla de clonación → Relación molar de ligadura → Mezcla de ensamblaje de ADN
- Explorar herramientas de biología → calculadoras de biología
Comentarios
Informa problemas o comparte solicitudes para ayudar a mejorar esta herramienta.