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NGS 工作流程

NGS 覆蓋計算機(平均深度)

根據目標大小和讀取計數 (PE/SE) 或總產量 (Gb) 估計平均 NGS 覆蓋率。包括可用率、映射率、目標命中率和重複率,並反算目標深度所需的資料。

本頁僅供教育與研究輔助用途,不能取代正式實驗設計、統計審查、臨床判讀或安全規範。

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使用方法(3步)

  1. 選擇一個範例或輸入目標大小(基因組大小/總目標區域)。
  2. 輸入讀取計數 (PE/SE) 或總產量 (Gb)。
  3. 出現平均深度。如果需要,調整因子或使用逆計算。

這是一個估計。實際覆蓋率並不統一,並且隨重複、GC 偏差、設計和分析而變化。使用 QC 覆蓋率分佈進行驗證。

輸入

目標尺寸

WGS 使用基因組大小;外顯子組/面板使用總目標大小 (bp)。

範例:3.2 Gb(約人類 WGS)/50 Mb(約人類外顯子組)

輸入方式

因數 (0–1)

您可以保留預設值進行粗略估計。

選項

≥k× 是基於 Poisson 的參考,假設均勻隨機覆蓋。實際資料會有所不同(在高深度,可以使用正態近似)。

結果(平均深度)

平均深度(×)
目標尺寸
輸入方式
有效因子
逆(所需資料)
≥k×(指導)

中間計算(原始→可用→映射→目標→唯一)

步驟 基地(汽車單位)

≥k×比例(指導)

閾值 P(深度≥k)

基於 Poisson 的參考,平均深度為 λ(由於覆蓋範圍不均勻,因此不確定)。

計算方法

平均深度很有用,但均勻性是不同的。與覆蓋率分佈 QC 確認。

常見問題

30× WGS 需要多少次讀取?

它取決於目標大小、讀取長度和因素(映射率等)。根據您的條件使用逆計算。

達標率是多少?

落在目標區域的可用讀數的粗略部分(因試劑盒/條件而異)。

如果平均深度相同,那麼每個區域的深度是否相同?

不。平均值只是平均值,實際覆蓋範圍各不相同。以此作為指導。

≥k×比例準確嗎?

這是一個基於 Poisson 的參考,假設均勻隨機覆蓋。實際資料有所不同。

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