Cómo utilizar (3 pasos)
- Elija un ejemplo o ingrese el volumen de reacción y el recuento de reacciones (o placa de 96/384 pocillos).
- Establezca el excedente (por ejemplo, 10%) y los componentes (mezcla 2×, imprimaciones, etc.).
- Se muestran los volúmenes por reacción, los totales con exceso y un protocolo de pipeteo.
Esta herramienta calcula volúmenes únicamente. Optimice las condiciones por separado.
Entradas
Resultados
tabla de componentes
| Componente | Por reacción (μL) | Total (μl) | Notas |
|---|
La tabla se desplaza horizontalmente.
“Separado” indica componentes que normalmente se agregan fuera de la mezcla maestra (por ejemplo, plantilla).
Protocolo (listo para copiar)
—
Compartir URL / Exportar
Las URL compartidas incluyen entradas (incluidos componentes) y pueden ser largas.
como se calcula
- De la concentración al volumen: Usando C1V1=C2V2, V1 = (C_final / C_stock) × Vtotal.
- Concentración de veces (2×/5×): V = (final_x / stock_x) × Vtotal (normalmente final = 1×).
- excedente: El porcentaje se redondea hacia arriba (techo), preparado = techo (pocillos × (1 + pct/100)).
- Agua (llenado): Agua = Vtotal − ΣV(componente). Negativo significa un error.
- Totales: Los componentes incluidos en la mezcla maestra utilizan cantidad preparada; Los componentes separados utilizan el recuento de pocillos (conmutable).
Esta herramienta calcula volúmenes únicamente; no garantiza el éxito experimental.
Preguntas frecuentes
¿Qué es una mezcla maestra?
Una mezcla maestra es una mezcla de reactivos común preparada para múltiples reacciones. Reduce los pasos de pipeteo y la variabilidad.
¿Cuánto excedente debo agregar?
Una guía típica es del 5 al 10 % o +1 de reacción. Ajuste según el pipeteo y el recuento de reacciones.
¿Cómo ingreso una mezcla maestra 2× (o 5×)?
Introdúzcalo como una concentración de pliegue. Para que una mezcla 2X llegue a 1X final, el volumen es aproximadamente la mitad del volumen de reacción (calculado automáticamente).
¿Debería incluirse la plantilla en la mezcla maestra?
A menudo, la plantilla se agrega por separado para reducir el riesgo de contaminación y el sesgo entre muestras. Esta herramienta tiene como valor predeterminado la suma separada (conmutable).
¿Por qué el volumen de agua es negativo?
Los totales de los componentes exceden el volumen de reacción. Aumente el volumen de reacción o reduzca los volúmenes de los componentes (especialmente la plantilla).
Obtuve un volumen muy pequeño (por ejemplo, 0,1 µL).
Estos volúmenes son difíciles de pipetear. Considere una dilución intermedia o ajustar el volumen de reacción.
¿Puedo usar esto para qPCR?
Sí. Introduzca una mezcla 2× qPCR y concentraciones de cebador para calcular los volúmenes totales.
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