Come utilizzare (3 passaggi)
- Selezionare il tipo di acido nucleico (dsDNA, ecc.) e la lunghezza (bp/nt).
- Immettere un valore noto tra ng/μL, nM o copie/μL.
- Gli altri valori vengono calcolati automaticamente. Inserisci il volume per vedere i totali.
Dati (tipo, lunghezza, concentrazione)
Risultati (ng/μL, nM, copie)
I risultati verranno visualizzati qui.
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Come viene calcolato
- Peso molecolare = lunghezza × fattore (circa)
mol/L = g/L ÷ molecular weightcopies/L = mol/L × Avogadro's constant- L'immissione del volume produce ng totale, pmol totale e copie totali.
Domande frequenti
Quanti sono 10 ng/μL in nM?
Dipende dalla lunghezza del frammento e dal tipo di acido nucleico. Gli stessi 10 ng/μL danno un valore nM molto più elevato per un frammento corto rispetto a un amplicone o trascritto lungo.
Come vengono calcolati i numeri di copie?
Lo strumento converte la concentrazione di massa in concentrazione molare attraverso il peso molecolare, quindi moltiplica la quantità molare per la costante di Avogadro per ottenere le copie.
Perché i fattori differiscono tra dsDNA e RNA?
Il peso molecolare medio per base o coppia di basi differisce in base al tipo di acido nucleico. Questo strumento utilizza fattori approssimativi standard per dsDNA, ssDNA, RNA e oligoelementi.
Posso convertire senza lunghezza (bp/nt)?
La lunghezza è necessaria per stimare il peso molecolare. Se conosci il peso molecolare esatto, inseriscilo direttamente in g/mol.
Cosa mostra l'immissione del volume?
Calcola la massa totale, il pmol totale e le copie totali nel volume inserito, utile per i totali delle provette, le aliquote e la pianificazione della diluizione.
Cosa include l'URL di condivisione?
Ripristina i valori immessi (tipo, lunghezza, unità, ecc.).
Come scegliere innanzitutto il risultato giusto
Per qPCR e standard
Se si stanno preparando standard o stime di modelli, copie/μL è spesso il risultato target. Iniziare da ng/μL o nM, quindi convertire in copie/μL solo dopo aver confermato la lunghezza del frammento e se la molecola è dsDNA, ssDNA o RNA.
Per flussi di lavoro NGS e diluizione
Se si raggruppano librerie o si cerca un livello molare uguale, nM è di solito il risultato da controllare per primo. Convertire da ng/μL usando la lunghezza del frammento adatta all'inserto o alla distribuzione reale della libreria.
Per rapidi controlli di integrità
Se un altro strumento fornisce una risposta molto diversa, confrontare prima la lunghezza del frammento, il tipo di acido nucleico e la convenzione del peso molecolare. Controlla questi presupposti prima di decidere che un risultato è sbagliato.
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