ELISA tukang kurva standar (4PL/5PL) | hitung konsentrasi dari OD

Cara menggunakan (3 langkah)

Pilih contoh atau tempel standar (konsentrasi dan sinyal).
Pilih 4PL/5PL, bobot, dan pengaturan lainnya.
Kurva dan konsentrasi yang tidak diketahui muncul (ekstrapolasi ditandai).

Ini adalah sebuah model. Ekstrapolasi di luar kisaran standar bisa jadi tidak akurat. Gunakan pengurangan kosong hanya bila diperlukan.

Input (standar, tidak diketahui, pengaturan)

Contoh (yang telah ditetapkan)

—

Model Pembobotan sumbu x log10 (disarankan) Kosong (0 konsentrasi) Satuan konsentrasi Satuan khusus

Opsi tampilan

Rata-rata ulangan (konsentrasi/sampel yang sama)

Tampilkan plot sisa

Tampilkan perhitungan kembali (pemulihan)

Tampilkan 95% CI untuk parameter (perkiraan)

Standar (tempel)

Kolom minimal: concentration dan signal. Beberapa baris dengan konsentrasi yang sama dianggap sebagai ulangan.

Tidak diketahui (opsional)

Kolom minimal: sample dan signal. Jika dilution_factor kosong, maka dianggap 1.

Komputasi otomatis (perbarui perubahan input)

Hasil (kurva & konsentrasi)

Model

—

Pembobotan

—

Poin yang digunakan (konsen>0)

—

R² (panduan)

—

RMSE (panduan)

—

AIC (panduan)

—

Perbandingan AIC (ref)

—

Maksudnya kosong

—

R² dan AIC adalah panduan. Periksa juga residu dan apakah nilainya diekstrapolasi.

Kurva standar

Konsentrasi yang dikecualikan

—

Plot sisa (opsional)

Parameter (A, B, C, D, G)

param	nilai	95% CI (perkiraan)

Panduan: A=Bawah (konsentrasi rendah), D=Atas (tinggi), C=EC50 (titik tengah), B=Hill kemiringan, G=asimetri (hanya 5PL). Secara internal kami menghitung (x/C)^B sebagai exp(B·ln(x/C)). Log10 pada sumbu x adalah untuk keterbacaan.

QC (perhitungan kembali / pemulihan)

label	conc_nominal	sinyal_berarti	conc_hat	pemulihan

Tidak diketahui (y → konsentrasi)

sampel	sinyal_berarti	DF	kesimpulan_diukur	conc_asli	bendera

Bagaimana cara menghitungnya

Pasangkan kurva logistik 4PL/5PL dengan kuadrat terkecil nonlinier.
Konsentrasi yang tidak diketahui dihitung dengan membalikkan kurva yang dipasang.
Pembobotan (1/y, 1/y², dll.) dapat membantu menangani varians antar rentang konsentrasi.

Nilai adalah panduan. Periksa juga outlier, rentang standar, dan kondisi pengenceran.

FAQ

Haruskah saya menggunakan 4PL atau 5PL?

4PL seringkali sudah cukup. Gunakan 5PL jika diperlukan asimetri (bandingkan dengan AIC, dll.).

Apakah saya memerlukan pembobotan (1/y, 1/y²)?

Tidak diperlukan. Mulailah tanpa memberi bobot dan cobalah jika bias muncul di seluruh rentang.

Bagaimana cara menangani konsentrasi 0 (kosong)?

Secara default, blanko dikecualikan dari pemasangan (berfungsi baik dengan log x). Gunakan pengurangan kosong hanya jika diperlukan.

Nilai yang tidak diketahui berada di luar kisaran standar.

Ini akan ditampilkan sebagai ekstrapolasi. Akurasi menurun, jadi encerkan dan ukur kembali dalam jangkauan.

qPCR kalkulator kurva standar
Alur kerja kuantifikasi serupa (standar → kurva → tidak diketahui).
Konsentrasi & kemurnian A260
Bermanfaat untuk persiapan sampel dan QC.
DNA/RNA konsentrasi ↔ mol ↔ nomor salinan
Alat kuantifikasi lain untuk asam nukleat.

Komentar

Tinggalkan pertanyaan, permintaan, atau koreksi di komentar.