Rumah / Sains & teknik / Biologi / qPCR kurva standar

← Biologi

qPCR Regresi

qPCR kalkulator kurva standar (efisiensi, R², tidak diketahui)

Buat kurva standar dari Kuantitas (jumlah salinan atau konsentrasi) dan Ct, hitung kemiringan, intersep, R², dan efisiensi PCR (%). Hitung kembali kuantitas yang tidak diketahui dengan plot sisa, pita 95%, log langkah, CSV/LaTeX, dan bagikan URL.

Semua penghitungan dijalankan di browser Anda; data tidak terkirim. Gunakan untuk penelitian/pendidikan.

Bahasa lain ja | en | zh-CN | es | pt-BR | id | fr | hi-IN | ar

Cara menggunakan (3 langkah)

  1. Tempelkan poin standar (Kuantitas, Ct) atau muat file CSV. Baris dengan Kuantitas yang sama dianggap sebagai ulangan.
  2. Pilih metode regresi (OLS/WLS) dan opsi seperti pita 95%. Masukkan nilai Ct yang tidak diketahui jika Anda memilikinya.
  3. Klik Hitung untuk melihat kurva standar, efisiensi, pemeriksaan QC, estimasi yang tidak diketahui, dan log langkah. Bagikan URL mempertahankan pengaturan yang sama.

Pesanan yang direkomendasikan

  1. Pertama, buat kurva standar (halaman ini)
  2. Selanjutnya, tinjau efisiensi PCR (%) → Lompat ke efisiensi
  3. Jika perlu, hitung ekspresi relatif (ΔCt / ΔΔCt) → ΔCt / ΔΔCt

Masuk lebih dalam

Masukan dan opsi data

Default adalah contohnya. Memilih preset akan menggantikan data dan pengaturan standar/tidak diketahui. Untuk data Anda sendiri, tempel dan klik Hitung (atau Atur Ulang). Langsung ke hasil

Tip pembobotan WLS

WLS cocok dengan bobot yang bijaksana. 1/Q dan 1/Q² meningkatkan pengaruh poin kuantitas rendah. Gunakan w kolom untuk mengatur bobot per poin.

Hasil (ringkasan)

PCR efisiensi (%)

Dihitung dari kemiringan m as Efficiency = (10^(-1/m) - 1) × 100. Kisaran yang ditampilkan adalah panduan.

Hasilnya akan muncul di sini.

Rentang adalah panduan. Untuk penelitian/pendidikan, tinjau poin standar dan residu bersama-sama.

Pemeriksaan kualitas (panduan)

Tingkat konsentrasi (rata-rata ± SD)

Kuantitas log10Q n Ct_berarti Ct_SD

Poin standar (baris pas)

Kolom lanjutan (berat / yhat / sisa / leverage / juru masakD) dapat diubah.

Kuantitas log10Q Kt berat ya sisa daya ungkit juru masakD

Sampel tidak diketahui (Ct → Kuantitas)

Sampel Kt log10Q_hat Kuantitas_topi DF Kuantitas_dikoreksi

Kurva standar dan residu

Kurva standar (Ct vs log10(Kuantitas))
Grafik tidak didukung di browser ini. Lihat tabel untuk mengetahui hasilnya.
Arahkan kursor ke titik untuk melihat detailnya.
Sisa vs perkiraan Ct
Grafik tidak didukung di browser ini. Lihat tabel untuk mengetahui hasilnya.
Arahkan kursor ke titik untuk melihat detailnya.

Langkah-langkah perhitungan (Cara menghitungnya)

    Catatan untuk pendidik

    FAQ

    Apa itu kurva standar qPCR?

    Kurva yang menghubungkan kuantitas standar (jumlah salinan atau konsentrasi) ke Ct dengan menyesuaikan Ct vs log10(kuantitas). Ini membantu memeriksa linearitas (R²) dan efisiensi amplifikasi.

    Berapa banyak poin standar yang dibutuhkan?

    Setidaknya diperlukan dua titik agar sesuai dengan sebuah garis. Untuk pemeriksaan linearitas dan outlier, direkomendasikan 4–6 poin.

    Bagaimana efisiensi PCR (%) dihitung?

    Dari kemiringan m: Efisiensi = (10^(-1/m) - 1) × 100. Kisaran yang ditampilkan adalah panduan.

    Apa yang ditunjukkan oleh kemiringan sekitar -3,32?

    Untuk rangkaian pengenceran 10×, kemiringan mendekati -3,32 menunjukkan efisiensi nyata sekitar 100% (panduan ideal).

    Bisakah efisiensi melebihi 100%?

    Karena disimpulkan dari kemiringan, nilai semu di atas 100% dapat terjadi akibat kesalahan pengenceran atau penghambatan. Perlakukan itu sebagai panduan dan periksa residu dan poin standar.

    Apakah pembagian URL menyertakan data?

    Hanya pengaturan (metode dan opsi pita) yang disimpan. Data standar dan tidak diketahui tidak disertakan.

    Satuan apa yang harus saya gunakan untuk Kuantitas?

    Unit apa pun baik-baik saja (nomor salinan, ng, konsentrasi). Kuantitas harus positif untuk log10.

    Referensi (catatan)

    Panduan yang ditampilkan di halaman ini adalah referensi umum. Untuk penelitian/pendidikan, konsultasikan dengan sumber primer bila diperlukan.

    Komentar

    Bagikan pertanyaan atau peningkatan (komentar dimuat setelah Anda mengklik tombol).