कैसे उपयोग करें (3 चरण)
- एक उदाहरण चुनें या प्रतिक्रिया मात्रा और प्रतिक्रिया गणना (या 96/384 वेल प्लेट) दर्ज करें।
- ओवरएज (जैसे, 10%) और घटक (2× मिश्रण, प्राइमर, आदि) सेट करें।
- प्रति-प्रतिक्रिया मात्रा, ओवरएज के साथ कुल योग और एक पिपेटिंग प्रोटोकॉल दिखाया गया है।
यह टूल केवल वॉल्यूम की गणना करता है। स्थितियों को अलग से अनुकूलित करें.
इनपुट
परिणाम
घटक तालिका
| घटक | प्रति प्रतिक्रिया (μL) | कुल (µL) | टिप्पणियाँ |
|---|
तालिका क्षैतिज रूप से स्क्रॉल होती है.
"पृथक" आम तौर पर मास्टर मिश्रण (उदाहरण के लिए, टेम्पलेट) के बाहर जोड़े गए घटकों को इंगित करता है।
प्रोटोकॉल (कॉपी-तैयार)
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शेयर यूआरएल में इनपुट (घटकों सहित) शामिल हैं और ये लंबे हो सकते हैं।
इसकी गणना कैसे की जाती है
- एकाग्रता से आयतन तक: C1V1=C2V2, V1 = (C_final / C_stock) × Vtotal का उपयोग करना।
- मोड़ो की सघनता (2×/5×): V = (अंतिम_x / स्टॉक_x) × Vकुल (आमतौर पर अंतिम = 1×)।
- अधिक उम्र होना: प्रतिशत को पूर्णांकित किया गया है (छत), तैयार = छत (कुआँ × (1 + पीसीटी/100))।
- पानी (भरें): जल = कुल - ΣV(घटक)। नकारात्मक का अर्थ है त्रुटि.
- कुल: मास्टर मिक्स में शामिल घटक तैयार गिनती का उपयोग करते हैं; अलग-अलग घटक वेल्स काउंट (टॉगल करने योग्य) का उपयोग करते हैं।
यह उपकरण केवल वॉल्यूम की गणना करता है; यह प्रयोगात्मक सफलता की गारंटी नहीं देता.
सामान्य प्रश्न
मास्टर मिक्स क्या है?
मास्टर मिश्रण कई प्रतिक्रियाओं के लिए तैयार किया गया एक सामान्य अभिकर्मक मिश्रण है। यह पिपेटिंग चरणों और परिवर्तनशीलता को कम करता है।
मुझे कितना ओवरएज जोड़ना चाहिए?
एक सामान्य मार्गदर्शिका 5-10% या +1 प्रतिक्रिया है। पिपेटिंग और प्रतिक्रिया गणना के आधार पर समायोजित करें।
मैं 2× (या 5×) मास्टर मिक्स कैसे दर्ज करूं?
इसे एक गुना एकाग्रता के रूप में दर्ज करें। 2× मिश्रण को 1× अंतिम तक पहुंचने के लिए, मात्रा प्रतिक्रिया मात्रा का लगभग आधा है (स्वचालित रूप से गणना की जाती है)।
क्या टेम्पलेट को मास्टर मिक्स में शामिल किया जाना चाहिए?
संदूषण जोखिम और नमूना-से-नमूना पूर्वाग्रह को कम करने के लिए अक्सर टेम्पलेट को अलग से जोड़ा जाता है। यह टूल डिफॉल्ट रूप से जोड़ को अलग करता है (टॉगल करने योग्य)।
जल का आयतन ऋणात्मक क्यों है?
घटकों का योग प्रतिक्रिया मात्रा से अधिक है। प्रतिक्रिया की मात्रा बढ़ाएँ या घटक की मात्रा कम करें (विशेषकर टेम्पलेट)।
मुझे बहुत छोटी मात्रा मिली (जैसे, 0.1 μL)।
ऐसी मात्राओं को पिपेट करना कठिन होता है। मध्यवर्ती तनुकरण या प्रतिक्रिया मात्रा को समायोजित करने पर विचार करें।
क्या मैं इसका उपयोग qPCR के लिए कर सकता हूँ?
हाँ. कुल मात्रा की गणना करने के लिए 2× qPCR मिश्रण और प्राइमर सांद्रता दर्ज करें।
संबंधित उपकरण
- एनीलिंग तापमान गाइड → प्राइमर टीएम कैलकुलेटर
- क्लोनिंग मिश्रण की मात्रा → बंधाव दाढ़ अनुपात → DNA असेंबली मिश्रण
- जीवविज्ञान उपकरण ब्राउज़ करें → जीवविज्ञान कैलकुलेटर
प्रतिक्रिया
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