Comment utiliser (3 étapes)
- Sélectionnez un exemple ou collez des normes (concentration et signal).
- Choisissez 4PL/5PL, la pondération et d'autres paramètres.
- La courbe et les concentrations inconnues apparaissent (l'extrapolation est signalée).
Ceci est un modèle. L'extrapolation en dehors de la plage standard peut être inexacte. Utilisez la soustraction à blanc uniquement lorsque cela est nécessaire.
Entrées (normes, inconnues, paramètres)
—
Options d'affichage
Colonnes minimales : concentration et signal. Plusieurs lignes avec la même concentration sont traitées comme des répliques.
Colonnes minimales : sample et signal. Si dilution_factor est vide, il est traité comme 1.
Résultats (courbe & concentrations)
R² et AIC sont des guides. Vérifiez également les résidus et si les valeurs sont extrapolées.
Courbe standard
Terrain résiduel (facultatif)
Paramètres (A, B, C, D, G)
| paramètre | valeur | IC à 95 % (environ) |
|---|
Guide : A=Bas (faible concentration), D=Haut (élevé), C=EC50 (point médian), B=Hill pente, G=asymétrie (5PL uniquement). En interne, nous calculons (x/C)^B comme exp(B·ln(x/C)). Log10 sur l'axe des x est destiné à la lisibilité.
QC (back-calcul / récupération)
| étiquette | conc_nominal | signal_mean | conc_hat | récupération |
|---|
Inconnues (y → concentration)
| échantillon | signal_mean | DF | conc_mesuré | conc_original | drapeau |
|---|
Comment c'est calculé
- Ajustez une courbe logistique 4PL/5PL avec des moindres carrés non linéaires.
- Les concentrations inconnues sont calculées en inversant la courbe ajustée.
- La pondération (1/an, 1/an², etc.) peut aider à gérer la variance entre les plages de concentration.
Les valeurs sont des guides. Vérifiez également les valeurs aberrantes, les plages standard et les conditions de dilution.
FAQ
Dois-je utiliser le 4PL ou le 5PL ?
Le 4PL est souvent suffisant. Utilisez 5PL si une asymétrie est nécessaire (comparer avec AIC, etc.).
Ai-je besoin d’une pondération (1/an, 1/an²) ?
Pas obligatoire. Commencez sans pondération et essayez-le si un biais apparaît dans toute la plage.
Comment dois-je gérer la concentration 0 (blanc) ?
Par défaut, les blancs sont exclus de l'ajustement (fonctionne bien avec le journal x). Utilisez la soustraction à blanc uniquement si nécessaire.
Une valeur inconnue est en dehors de la plage standard.
Il sera présenté comme extrapolé. La précision diminue, donc diluez et mesurez à nouveau dans les limites.
Outils associés
- qPCR calculateur de courbe standard
Workflow de quantification similaire (étalons → courbe → inconnues).
- Concentration et pureté A260
Utile pour la préparation des échantillons et le contrôle qualité.
- DNA/RNA concentration ↔ mol ↔ nombre de copies
Un autre outil de quantification des acides nucléiques.
Commentaires
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