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Bioquímica Curva estándar

Calculadora de curva estándar de proteínas (BCA / Bradford)

Construya una curva estándar y estime las concentraciones de proteínas de muestras desconocidas. Admite regresión lineal/cuadrática (comparación automática AICc), resta en blanco, réplicas (media ± DE), residuos y exclusión de puntos.

Todos los cálculos se ejecutan en su navegador; Los datos no se envían.

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Ejemplo (preestablecido)

Elija un ejemplo para completar las entradas y ver los resultados de inmediato.

Descripción
Cómo utilizar (3 pasos)
  1. Pegue estándares (concentración y absorbancia) o importe un archivo CSV/TSV.
  2. Seleccione el ensayo (BCA/Bradford) y ajuste (automático/lineal/cuadrático).
  3. Aparece la curva estándar y las concentraciones desconocidas (se admiten factores de dilución).

Las estimaciones fuera de rango (extrapolación) pueden ser inexactas. Verifique las advertencias en los resultados. Esta es una herramienta de cálculo y no prescribe optimización experimental.

Entrada (pegar / CSV)

Ensayo
Resta en blanco (concentración 0)
Media en blanco:
Ponderación (opcional)
Nota
Si SD está disponible, puede pesar 1/SD² (se recomiendan réplicas).

Estándares

Formato: col 1 = concentración, col 2+ = absorbancia (rep1, rep2,…). TSV/CSV compatible.

Desconocidos

Formato: columna 1 = nombre de la muestra, columna 2+ = absorbancia (se admiten columnas de representación), última columna opcional: factor_dilución.

Avanzado (exclusión de puntos/residuales/CI)
Exclusión de puntos
Haga clic en puntos estándar en el gráfico para excluir/restaurar (Deshacer disponible)
excluido

Resultados

Modelo seleccionado
Ecuación
RMSE
AICc
Comparación (automática)

Parcelas

Tabla (estándares)

Concentración media SD ŷ residual excluido

Tabla (incógnitas)

muestra Abdominales medios Conc (medido) factor de dilución Conc (valores) En rango

Nota: Las estimaciones fuera de rango (extrapolación) pueden ser inexactas.

Flujo de trabajo

  1. Introduzca los estándares (concentración x y absorbancia y). Con réplicas, la herramienta calcula la media ± DE.
  2. Opcionalmente, reste la absorbancia media del blanco (concentración 0) (aplicada consistentemente a estándares e incógnitas).
  3. Ajustar con lineal (y=a+bx) o cuadrático (y=a+bx+cx²) y mostrar métricas (R²/RMSE/AICc).
  4. Para las incógnitas, vuelva a calcular la concentración a partir de la absorbancia y aplique factores de dilución para obtener las concentraciones de stock.

Preguntas frecuentes

¿Cuál es la diferencia entre los ensayos BCA y Bradford?

Ambos estiman la concentración de proteínas a partir de la absorbancia. La forma de la curva puede cambiar según las condiciones y el rango, por lo que esta herramienta admite ajustes lineales y cuadráticos.

¿Qué debo ingresar primero?

Introduzca los estándares (concentraciones conocidas) y su absorbancia. Si proporciona columnas replicadas, la herramienta calcula la media ± DE automáticamente.

¿Necesito resta en blanco?

A menudo, restar la absorbancia de la concentración 0 (blanco) mejora la estabilidad. Aplique la misma resta en blanco tanto a los estándares como a las incógnitas.

¿Debo utilizar un ajuste lineal o cuadrático?

El ajuste cuadrático puede ser mejor en un rango amplio, mientras que un rango reducido puede funcionar mejor con un ajuste lineal. Utilice comparación automática (AICc); Si la diferencia es pequeña, suele ser más seguro preferir el modelo lineal más simple.

Mi concentración desconocida está fuera del rango estándar.

Las estimaciones fuera de rango son extrapolaciones y pueden ser inexactas. Considere ajustar los factores de dilución o el rango estándar.

¿Cómo ingreso los factores de dilución?

Puede ingresar un factor de dilución por fila desconocida. La concentración de stock se calcula como concentración medida × factor de dilución.

¿Puedo utilizar estos resultados en un artículo o informe?

Sí, pero incluya configuraciones clave como el tipo de ajuste (lineal/cuadrático), si se utilizó resta en blanco y si hubo extrapolaciones presentes, para que el análisis sea reproducible.