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biología molecular Clonación

Calculadora de relación molar de ligadura (vector:insertar)

Calcule la masa de inserción requerida (ng) a partir de la masa y la longitud del vector más una relación molar objetivo (por ejemplo, 1:3). Si se conoce la concentración, también se muestra el volumen requerido (μL).

Todos los cálculos se ejecutan en su navegador. No se envían datos.

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Cómo utilizar (3 pasos)

  1. Seleccione un ejemplo o ingrese la longitud del vector (pb) e inserte la longitud (pb).
  2. Introduzca la relación molar objetivo (por ejemplo, 1:3) y la masa del vector (ng).
  3. Se muestran la masa del inserto requerida (ng) y el volumen (μL) (si se proporciona la concentración).

Esta es una calculadora de cantidades. Las proporciones óptimas dependen del tipo de extremo y de las condiciones; Sigue tu protocolo.

Entradas (vector/inserción)

—

Elija cómo establecer la cantidad del vector.
Avanzado

Resultados

Insertar masa (ng)
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Volumen de inserción (μL)
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Volumen vectorial (μL)
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Masa total DNA (ng)
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Volumen total DNA (μL)
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DNA Longitud (pb) Masa (ng) Concentración (ng/μL) Volumen (μL) pmol (guía)
El recurso compartido URL puede restaurar sus entradas (teclas inglesas fijas).

Esta herramienta calcula importes únicamente. No garantiza el éxito.

Como se calcula

  1. Como una aproximación de dsDNA, pmol = (masa_ng × 1000) / (pb × 660).
  2. Calcule el pmol del vector a partir de la masa y la longitud del vector.
  3. Inserte pmol objetivo = pmol vectorial × relación objetivo, luego convierta nuevamente a masa (ng).
  4. Si se conoce la concentración, volumen = masa/concentración.

Los valores son guías. Siga su protocolo para las condiciones finales.

Preguntas frecuentes

¿Por qué utilizar proporciones molares?
Los fragmentos de diferentes longitudes tienen diferentes recuentos de moléculas con la misma masa. Las proporciones molares mantienen constante el recuento de moléculas.
¿Qué proporciones se utilizan comúnmente?
Las proporciones de vector:inserción como 1:3 o 1:5 son puntos de partida comunes. Las proporciones óptimas dependen de los fines y las condiciones.
¿Qué longitud de vector debo usar?
Utilice la longitud real del fragmento de vector linealizado utilizado para la ligadura, a menudo la longitud completa del plásmido.
No sé la concentración del inserto.
Aún puedes calcular la masa requerida (ng). El volumen (μL) se muestra solo cuando se proporciona la concentración.
Mis volúmenes son extremadamente pequeños (por ejemplo, 0,1 µL).
Los volúmenes muy pequeños son propensos a errores. Considere una dilución intermedia o ajuste la masa del vector y el volumen de reacción.
¿Estas cantidades garantizarán el éxito?
No. Esta herramienta solo calcula montos. El éxito depende del tipo de final, las condiciones de reacción y la calidad de DNA.