ELISA ajustador de curva padrão (4PL/5PL) | calcular a concentração a partir da DO

Como usar (3 passos)

Selecione um exemplo ou cole padrões (concentração e sinal).
Escolha 4PL/5PL, ponderação e outras configurações.
A curva e as concentrações desconhecidas aparecem (a extrapolação é sinalizada).

Este é um modelo. Extrapolações fora da faixa padrão podem ser imprecisas. Use subtração em branco somente quando necessário.

Entradas (padrões, incógnitas, configurações)

Exemplo (predefinido)

—

Modelo Ponderação eixo x log10 (recomendado) Em branco (0 concentração) Unidade de concentração Unidade personalizada

Opções de exibição

Réplicas médias (mesma concentração/amostra)

Mostrar gráfico residual

Mostrar cálculo retroativo (recuperação)

Mostrar IC de 95% para parâmetros (aproximadamente)

Padrões (colar)

Colunas mínimas: concentration e signal. Várias linhas com a mesma concentração são tratadas como réplicas.

Desconhecidos (opcional)

Colunas mínimas: sample e signal. Se diluição_fator estiver em branco, será tratado como 1.

Computação automática (atualização sobre alterações de entrada)

Resultados (curva e concentrações)

Modelo

—

Ponderação

—

Pontos usados (conc>0)

—

R² (guia)

—

RMSE (guia)

—

AIC (guia)

—

Comparação AIC (ref)

—

Média em branco

—

R² e AIC são guias. Verifique também os resíduos e se os valores são extrapolados.

Curva padrão

Concentrações excluídas

—

Gráfico residual (opcional)

Parâmetros (A, B, C, D, G)

parâmetro	valor	IC 95% (aproximadamente)

Guia: A=Inferior (baixa concentração), D=Topo (alta), C=EC50 (ponto médio), B=Hill inclinação, G=assimetria (somente 5PL). Internamente calculamos (x/C)^B como exp(B·ln(x/C)). Log10 no eixo x é para facilitar a leitura.

CQ (cálculo retroativo/recuperação)

rótulo	conc_nominal	sinal_média	conc_hat	recuperação

Incógnitas (y → concentração)

amostra	sinal_média	DF	conc_medida	conc_original	bandeira

Como é calculado

Ajuste uma curva logística 4PL/5PL com mínimos quadrados não lineares.
Concentrações desconhecidas são calculadas invertendo a curva ajustada.
A ponderação (1/a, 1/a², etc.) pode ajudar a lidar com a variação entre faixas de concentração.

Os valores são guias. Verifique também valores discrepantes, intervalos padrão e condições de diluição.

FAQ

Devo usar 4PL ou 5PL?

4PL geralmente é suficiente. Use 5PL se for necessária assimetria (compare com AIC, etc.).

Preciso de ponderação (1/a, 1/a²)?

Não é obrigatório. Comece sem ponderação e experimente se aparecer tendência em toda a faixa.

Como devo lidar com a concentração 0 (em branco)?

Por padrão, os espaços em branco são excluídos do ajuste (funciona bem com log x). Use subtração em branco somente se necessário.

Um valor desconhecido está fora do intervalo padrão.

Será mostrado como extrapolado. A precisão cai, então dilua e meça novamente dentro do alcance.

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