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Bioquímica Curva padrão

Calculadora de curva padrão de proteína (BCA / Bradford)

Construa uma curva padrão e estime as concentrações de proteínas de amostras desconhecidas. Suporta regressão linear/quadrática (comparação automática AICc), subtração em branco, replicações (média±SD), resíduos e exclusão de pontos.

Todos os cálculos são executados no seu navegador; os dados não são enviados.

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Exemplo (predefinido)

Escolha um exemplo para preencher as entradas e ver os resultados imediatamente.

Descrição
Como usar (3 passos)
  1. Cole padrões (concentração e absorbância) ou importe um arquivo CSV/TSV.
  2. Selecione ensaio (BCA/Bradford) e ajuste (automático/linear/quadrático).
  3. A curva padrão e concentrações desconhecidas aparecem (fatores de diluição suportados).

Estimativas fora da faixa (extrapolação) podem ser imprecisas. Verifique os avisos nos resultados. Esta é uma ferramenta de cálculo e não prescreve otimização experimental.

Entrada (colar / CSV)

Ensaio
Subtração em branco (concentração 0)
Média em branco:
Ponderação (opcional)
Nota
Se SD estiver disponível, você poderá pesar 1/SD² (recomenda-se réplicas).

Padrões

Formato: col 1 = concentração, col 2+ = absorbância (rep1, rep2, …). TSV/CSV suportado.

Incógnitas

Formato: col 1 = nome da amostra, col 2+ = absorbância (colunas rep suportadas), última coluna opcional: fator_de diluição.

Avançado (exclusão de pontos/resíduos/IC)
Exclusão de ponto
Clique nos pontos padrão no gráfico para excluir/restaurar (Desfazer disponível)
Excluído

Resultados

Modelo selecionado
Equação
REQM
AICc
Comparação (automática)

Parcelas

Tabela (padrões)

Concentração Média SD ŷ Residual Excluído

Tabela (incógnitas)

Amostra Abdominais médios Conc. (medida) Fator de diluição Conc (estoque) Dentro do alcance

Nota: Estimativas fora do intervalo (extrapolação) podem ser imprecisas.

Fluxo de trabalho

  1. Insira os padrões (concentração x e absorbância y). Com réplicas, a ferramenta calcula a média±DP.
  2. Opcionalmente, subtraia a absorvância média do branco (concentração 0) (aplicada consistentemente a padrões e incógnitas).
  3. Ajuste com linear (y=a+bx) ou quadrático (y=a+bx+cx²) e mostre métricas (R²/RMSE/AICc).
  4. Para incógnitas, calcule a concentração a partir da absorbância e aplique fatores de diluição para obter concentrações de estoque.

FAQ

Qual é a diferença entre os ensaios BCA e Bradford?

Ambos estimam a concentração de proteína a partir da absorbância. A forma da curva pode mudar de acordo com as condições e o intervalo, portanto, esta ferramenta oferece suporte a ajustes lineares e quadráticos.

O que devo inserir primeiro?

Insira os padrões (concentrações conhecidas) e sua absorbância. Se você fornecer colunas replicadas, a ferramenta calculará a média±SD automaticamente.

Preciso de subtração em branco?

Freqüentemente, subtrair a absorbância da concentração 0 (branco) melhora a estabilidade. Aplique a mesma subtração em branco aos padrões e às incógnitas.

Devo usar um ajuste linear ou quadrático?

Quadrático pode se ajustar melhor em uma faixa ampla, enquanto uma faixa estreita pode funcionar bem com um ajuste linear. Usar comparação automática (AICc); se a diferença for pequena, preferir o modelo linear mais simples costuma ser mais seguro.

Minha concentração desconhecida está fora da faixa padrão.

Estimativas fora do intervalo são extrapolações e podem ser imprecisas. Considere ajustar os fatores de diluição ou a faixa padrão.

Como insiro fatores de diluição?

Você pode inserir um fator de diluição por linha desconhecida. A concentração do estoque é calculada como concentração medida × fator de diluição.

Posso usar esses resultados em um artigo ou relatório?

Sim, mas inclua configurações importantes como tipo de ajuste (linear/quadrático), se foi usada subtração em branco e se extrapolações estavam presentes, para que a análise seja reproduzível.