使用方法（3步）
- 选择一个示例或输入主链和插入片段的片段长度 (bp) 和浓度 (ng/μL)。
- 选择摩尔比（例如，插入 2×）和主链量（pmol 或 ng）。
- 将显示所需的质量 (ng) 和体积 (μL)，以及配方（主混合物/试剂和剩余的水）。
这是一个数量计算器。推荐的条件因试剂盒和方案而异，因此请遵循您的方案。 Golden Gate 试剂预设仅作为计算示例。
输入（片段表）
结果
剩余水量 (µL)
—
总 DNA 体积 (µL)
—
总 DNA 质量 (ng)
—
2× 主混音 体积（微升）
—
| 片段 | 角色 | 长度（bp） | 目标（pmol） | 质量（纳克） | 体积（微升） | 注意事项 |
|---|
共享 URL 可以恢复您的输入（固定英文键）。
该工具仅计算金额。它并不能保证成功。
计算方法
- 作为 dsDNA 近似值， pmol =（质量ng×1000）/（bp×660）.
- 设置主干量（pmol 为 Gibson，ng 为 Golden Gate）并计算主干 pmol。
- 每个插入目标是 insert_target_pmol =backbone_pmol × 比率，然后转换为质量 (ng)。
- 如果浓度 (ng/µL) 已知， 体积=质量/浓度 给出体积 (μL)。
- 剩余水的计算方法是总反应体积减去主混合物/试剂和 DNA 体积。
价值观是指导。按照您的试剂盒/方案了解最终条件。
常见问题
Gibson 和 Golden Gate 有什么区别？
两者都组装 DNA 片段，但反应机制和酶不同。该工具计算要混合多少 DNA。
为什么使用摩尔比？
不同长度的片段在相同质量下具有不同的分子数。摩尔比使分子计数保持一致。
常用的比例有哪些？
根据经验，插入物通常是主干的 2 倍或 3 倍。这取决于装配，应该进行测试。
我可以在没有浓度值的情况下使用它吗？
是的。您仍然可以计算所需的质量 (ng)。仅当提供浓度时才会显示体积 (μL)。
我的体积非常小（例如 0.1 µL）。
非常小的体积很容易出错。考虑中间稀释或调整骨架量和反应体积。
我可以按原样使用 Golden Gate 试剂预设吗？
试剂量取决于试剂盒和方案。预设仅作为计算示例；遵循您的协议。
这些金额能保证成功吗？
不可以。该工具仅计算金额。成功取决于设计、DNA 质量和反应条件。