Come utilizzare (3 passaggi)
- Selezionare una piastra (o una piastra personalizzata), quindi inserire il numero di pozzetti e il volume finale (μL/pozzetto).
- Immettere il target (cellule/pozzetto o cellule/cm²) e la concentrazione stock (cellule/mL). Aggiungere vitalità (%) ed eccedenza (%) se necessario.
- Fare clic su "Calcola" per visualizzare il volume totale di preparazione e il volume per pozzetto. Il calcolo automatico aggiorna i risultati durante la modifica.
Dati (piastra, pozzetti, target, concentrazione)
Risultati (per pozzetto/totale)
Bene
- Sospensione cellulare
- —
- Media
- —
Totale (con eccedenza)
- Sospensione cellulare
- —
- Media
- —
- Volume totale
- —
Sommario
| Nave | — |
|---|---|
| Obiettivo | — |
| Celle richieste (totale) | — |
| Concentrazione finale della miscela di semina | — |
Come viene calcolato
- Celle richieste (totale) = target × pozzetti utilizzati × (1 + eccedenza)
- Volume della sospensione cellulare = cellule richieste ÷ (concentrazione stock × vitalità)
- Volume del supporto = volume totale - volume della sospensione cellulare
- Per pozzo = totale ÷ pozzi utilizzati
Come progettare un mix di semina adatto al piatto
Utilizzare questa pagina per tradurre un valore di cellule per pozzetto o di cellule per cm² target nei volumi effettivi di sospensione e di terreno necessari al banco.
Scegli prima la modalità di destinazione
La raccolta delle celle per pozzetto è più semplice quando il recipiente è fisso. Le cellule per centimetro quadrato sono migliori quando è necessaria una densità di attacco comparabile su piastre, fiasche o piatti diversi.
Cosa presuppone la calcolatrice
Si presuppone che la concentrazione delle scorte e la vitalità provengano dalla stessa sospensione conteggiata. Il totale delle celle richieste include l'eccesso in modo che il volume morto, la perdita del serbatoio o il pipettaggio multicanale non lascino gli ultimi pozzetti riempiti in modo insufficiente.
Errori comuni da evitare
- Miscelazione di una percentuale di vitalità da un conteggio con una concentrazione da un'altra sospensione.
- Utilizzo dell'area nominale del pozzetto di una marca di piastre durante la dispensazione in un altro formato.
- Ignorare l'avvertimento che il volume di sospensione cellulare richiesto supera già il volume della miscela finale.
Cosa fare quando lo stock è troppo diluito
Se il calcolatore indica che il volume della sospensione è maggiore della miscela finale, il piano è fisicamente impossibile a quella concentrazione. Concentrare le cellule, abbassare la densità target o aumentare il volume finale per pozzetto prima di procedere.
Vedi anche
Domande frequenti
Quanta eccedenza (volume morto) dovrei aggiungere?
Poiché durante il pipettaggio si perde un po' di volume, come valore indicativo è normale circa il 10%. Adattati al tuo protocollo.
Dice che la sospensione cellulare supera il volume finale.
La concentrazione delle tue azioni potrebbe essere troppo bassa. Considerare la concentrazione delle cellule, l'aumento del volume finale o la riduzione della densità target.
Perché inserire la vitalità (%)?
Ti consente di seminare in base a cellule vive. La minore vitalità aumenta il volume di sospensione cellulare richiesto.
Quando dovrei usare cellule/cm²?
Usalo quando vuoi abbinare la densità di semina in base alla superficie. L'area della piastra può variare in base al produttore, quindi regolala se necessario.
L'URL di condivisione include valori?
Poiché questa calcolatrice ha pochi campi, l'URL di condivisione include i valori inseriti. Il calcolo resta nel browser e i dati non vengono inviati.
Note pratiche per la preparazione alla semina cellulare
Scelta dell'obiettivo
Celle/pozzetto è più semplice quando la geometria della piastra è fissa. Celle/cm² è migliore quando ci si sposta tra i vasi e si desidera una densità di attacco paragonabile.
Pianificazione del volume
Il mix totale include l'eccedenza scelta. Ciò aiuta ad assorbire il volume morto dai serbatoi, dal pipettaggio multicanale e dalle piccole perdite di trasferimento.
Correzione della vitalità
Se il conteggio include cellule morte, utilizzare la vitalità in modo che il calcolatore semini in base agli equivalenti di cellule vive anziché alle particelle contate totali.
Avviso di scorte scarse
Quando il volume di sospensione richiesto è maggiore del volume della miscela finale, la soluzione è troppo diluita per quel piano. Concentrare le cellule, aumentare il volume finale o abbassare l'obiettivo di semina.
Prima di iniziare
Verificare che la concentrazione e la vitalità dello stock siano state misurate dalla stessa sospensione e confermare che l'area nominale e il volume di lavoro corrispondano alla piastra effettiva.
Registrazione delle condizioni
Se devi condividere le condizioni con i collaboratori, copia il blocco dei risultati o condividi l'URL in modo che i dati esatti, l'eccedenza e la modalità target viaggino con il calcolo.
Strumenti correlati
- Calcolatore dell'emocitometro (cellule/ml e vitalità) | CalcBEConverti le cellule contate e la vitalità in una concentrazione stock prima di progettare la miscela di semina finale.
- Calcolatrice A260 (concentrazione e purezza del DNA/RNA) | CalcBEControllare la concentrazione dell'acido nucleico separatamente quando il flusso di lavoro include la trasfezione o il follow-up molecolare dopo la semina.
- Calcolatore della diversità beta (Jaccard / Bray–Curtis) | CalcBEUtilizzarlo in seguito quando l'esperimento passa dalla configurazione delle piastre al confronto delle differenze dei campioni a livello di comunità.
- Convertitore centrifugo (rpm ↔ RCF ×g) | per raggio del rotore | CalcBEConverti le impostazioni della centrifuga quando la fase di preparazione prevede la pellettazione o il lavaggio delle cellule prima della risemina.
- Calcolatore dell'indice di diversità (Shannon & Simpson) | CalcBEMetriche di diversità aperte dopo che il test passa dalla placcatura cellulare alla composizione del campione o all'analisi in stile ecologico.
Commenti
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