Comment utiliser (3 étapes)
- Choisissez un exemple ou entrez le volume de réaction et le nombre de réactions (ou une plaque à 96/384 puits).
- Réglez le surplus (par exemple, 10 %) et les composants (mélange 2×, apprêts, etc.).
- Les volumes par réaction, les totaux avec excédent et un protocole de pipetage sont affichés.
Cet outil calcule uniquement les volumes. Optimisez les conditions séparément.
Entrées
Résultats
Tableau des composants
| Composant | Par réaction (µL) | Total (µL) | Remarques |
|---|
Le tableau défile horizontalement.
« Séparé » indique les composants généralement ajoutés en dehors du mix principal (par exemple, un modèle).
Protocole (prêt à copier)
—
Partager URL / Exporter
Les URL de partage incluent des entrées (y compris des composants) et peuvent être longues.
Comment c'est calculé
- De la concentration au volume: En utilisant C1V1=C2V2, V1 = (C_final / C_stock) × Vtotal.
- Fois la concentration (2×/5×): V = (final_x / stock_x) × Vtotal (généralement final = 1×).
- Excédent: Le pourcentage est arrondi (plafond), préparé = plafond (puits × (1 + pct/100)).
- Eau (remplir): Eau = Vtotal − ΣV(composante). Négatif signifie une erreur.
- Totaux: Les composants inclus dans le mélange principal utilisent le nombre préparé ; des composants séparés utilisent le nombre de puits (basculable).
Cet outil calcule uniquement les volumes ; cela ne garantit pas le succès expérimental.
FAQ
Qu’est-ce qu’un master mix ?
Un master mix est un mélange de réactifs commun préparé pour plusieurs réactions. Il réduit les étapes de pipetage et la variabilité.
Quel excédent dois-je ajouter ?
Un guide typique est une réaction de 5 à 10 % ou +1. Ajuster en fonction du pipetage et du nombre de réactions.
Comment puis-je saisir un master mix 2× (ou 5×) ?
Entrez-le sous forme de concentration de pli. Pour qu'un mélange 2× atteigne 1× final, le volume est d'environ la moitié du volume réactionnel (calculé automatiquement).
Le modèle doit-il être inclus dans le master mix ?
Souvent, le modèle est ajouté séparément pour réduire le risque de contamination et le biais d’un échantillon à l’autre. Par défaut, cet outil effectue un ajout séparé (basculable).
Pourquoi le volume d'eau est-il négatif ?
Les totaux des composants dépassent le volume de réaction. Augmentez le volume de réaction ou réduisez les volumes de composants (en particulier le modèle).
J'ai obtenu un très petit volume (par exemple, 0,1 µL).
De tels volumes sont difficiles à pipeter. Envisager une dilution intermédiaire ou un ajustement du volume réactionnel.
Puis-je l'utiliser pour qPCR ?
Oui. Entrez un mélange 2 × qPCR et des concentrations d'amorces pour calculer les volumes totaux.
Outils associés
- Guide des températures de recuit → Calculateur Primer Tm
- Volumes de mixage de clonage → Rapport molaire de ligature → DNA mélange d'assemblage
- Parcourir les outils de biologie → Calculateurs de biologie
Commentaires
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