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PCR 分子生物学

PCR 预混计算器:反应、最终浓度、过量

根据反应体积/计数和库存/最终浓度计算 PCR/qPCR 主混合物体积。支持超量(% 或 +1)、96/384 孔和复制就绪协议文本。

所有计算都在您的浏览器中运行。没有发送任何数据。

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使用方法(3步)

  1. 选择一个示例或输入反应体积和反应计数(或 96/384 孔板)。
  2. 设置过量(例如 10%)和成分(2× 混合物、底漆等)。
  3. 显示每次反应体积、过量总量和移液方案。

该工具仅计算体积。分别优化条件。

输入

反应设置

通常单独添加模板以降低污染风险和样品间偏差。

组件(快速模式)

水被计算为达到反应体积的剩余体积。

结果

反应(孔)
准备好的反应(包括过量)
反应体积
每孔分配(预混)
总预混体积

成分表

组件 每个反应 (μL) 总计(微升) 注释

表格水平滚动。

“单独”表示通常在主混合物之外添加的组分(例如模板)。

协议(复制就绪)
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共享 URL 包含输入(包括组件)并且可能很长。

计算方法

该工具仅计算体积;它并不能保证实验成功。

常见问题

什么是主混音?

主混合物是为多个反应准备的常见试剂混合物。它减少了移液步骤和变异性。

我应该添加多少超量?

典型的指导是 5–10% 或 +1 反应。根据移液和反应计数进行调整。

如何输入 2×(或 5×)主混音?

输入倍数浓度。对于 2× 混合达到 1× 最终,体积约为反应体积的一半(自动计算)。

模板是否应该包含在主混音中?

通常,模板是单独添加的,以降低污染风险和样品间偏差。该工具默认为单独添加(可切换)。

水的体积为什么是负值?

组分总量超过反应体积。增加反应体积或减少组分体积(尤其是模板)。

我得到的体积非常小(例如 0.1 µL)。

这样的体积很难移液。考虑中间稀释或调整反应体积。

我可以将其用于 qPCR 吗?

是的。输入 2× qPCR 混合物和引物浓度以计算总体积。

反馈意见

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