使用方法(3步)
- 选择一个示例或输入反应体积和反应计数(或 96/384 孔板)。
- 设置过量(例如 10%)和成分(2× 混合物、底漆等)。
- 显示每次反应体积、过量总量和移液方案。
该工具仅计算体积。分别优化条件。
输入
结果
反应(孔)
—
准备好的反应(包括过量)
—
反应体积
—
每孔分配(预混)
—
总预混体积
—
成分表
| 组件 | 每个反应 (μL) | 总计(微升) | 注释 |
|---|
表格水平滚动。
“单独”表示通常在主混合物之外添加的组分(例如模板)。
协议(复制就绪)
—
分享 URL / 导出
共享 URL 包含输入(包括组件)并且可能很长。
计算方法
- 从浓度到体积:使用C1V1=C2V2,V1 = (C_final / C_stock) × Vtotal。
- 倍数浓度(2×/5×):V = (final_x / stock_x) × Vtotal(通常最终 = 1×)。
- 超龄:百分比向上取整 (ceil),准备 = ceil(孔 × (1 + pct/100))。
- 水(注满):水 = Vtotal − ΣV(分量)。负数表示有错误。
- 总计:主混合物中包含的组分使用制备的计数;单独的组件使用孔计数(可切换)。
该工具仅计算体积;它并不能保证实验成功。
常见问题
什么是主混音?
主混合物是为多个反应准备的常见试剂混合物。它减少了移液步骤和变异性。
我应该添加多少超量?
典型的指导是 5–10% 或 +1 反应。根据移液和反应计数进行调整。
如何输入 2×(或 5×)主混音?
输入倍数浓度。对于 2× 混合达到 1× 最终,体积约为反应体积的一半(自动计算)。
模板是否应该包含在主混音中?
通常,模板是单独添加的,以降低污染风险和样品间偏差。该工具默认为单独添加(可切换)。
水的体积为什么是负值?
组分总量超过反应体积。增加反应体积或减少组分体积(尤其是模板)。
我得到的体积非常小(例如 0.1 µL)。
这样的体积很难移液。考虑中间稀释或调整反应体积。
我可以将其用于 qPCR 吗?
是的。输入 2× qPCR 混合物和引物浓度以计算总体积。
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