使用方法(3步)
- 选择一个示例或输入目标大小(基因组大小/总目标区域)。
- 输入读取计数 (PE/SE) 或总产量 (Gb)。
- 出现平均深度。如果需要,调整因子或使用逆计算。
这是一个估计。实际覆盖率并不统一,并且随重复、GC 偏差、设计和分析而变化。使用 QC 覆盖率分布进行验证。
输入
—
目标尺寸
WGS 使用基因组大小;外显子组/面板使用总目标大小 (bp)。
示例:3.2 Gb(约人类 WGS)/50 Mb(约人类外显子组)
输入方式
因数 (0–1)
您可以保留默认值进行粗略估计。
—
选项
≥k× 是基于 Poisson 的指南,假设均匀随机覆盖。实际数据会有所不同(在高深度,可以使用正态近似)。
结果(平均深度)
平均深度(×)
—
目标尺寸
—
输入方式
—
有效因子
—
逆(所需数据)
—
≥k×(指导)
—
中间计算(原始→可用→映射→目标→唯一)
| 步骤 | 基地(汽车单位) |
|---|
≥k×比例(指导)
| 阈值 | P(深度≥k) |
|---|
基于 Poisson 的指南,平均深度为 λ(由于覆盖范围不均匀,因此不确定)。
计算方法
- 根据读取计数 (PE/SE) 或总产量 (Gb) 计算 raw_bases。
- 应用可用率、映射率、目标值和重复率(1 个重复)来估计独特的目标碱基。
- 平均深度 = unique_on_target_bases / target_size。
- ≥k× 可以显示为基于 Poisson 的指南。
平均深度很有用,但均匀性是不同的。与覆盖率分布 QC 确认。
常见问题
30× WGS 需要多少次读取?
它取决于目标大小、读取长度和因素(映射率等)。根据您的条件使用逆计算。
达标率是多少?
落在目标区域的可用读数的粗略部分(因试剂盒/条件而异)。
如果平均深度相同,那么每个区域的深度是否相同?
不。平均值只是平均值,实际覆盖范围各不相同。以此作为指导。
≥k×比例准确吗?
这是一个基于 Poisson 的指南,假设均匀随机覆盖。实际数据有所不同。
相关工具
- DNA/RNA 浓度 ↔ 摩尔 ↔ 拷贝数
用于文库制备和输入转换。
- qPCR 标准曲线计算器
类似的定量工作流程(标准→曲线→反演)。
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