PCR kalkulator campuran utama | reaksi, konsentrasi, kelebihan

Cara menggunakan (3 langkah)

Pilih contoh atau masukkan volume reaksi dan jumlah reaksi (atau pelat sumur 96/384).
Tetapkan kelebihan (misalnya, 10%) dan komponen (campuran 2×, primer, dll.).
Volume per reaksi, total dengan kelebihan penggunaan, dan protokol pemipetan ditampilkan.

Alat ini hanya menghitung volume. Optimalkan kondisi secara terpisah.

masukan

Contoh (yang telah ditetapkan)

—

Modus

Pengaturan reaksi

Jenis penghitungan reaksi Reaksi (sumur/tabung)

Prasetel volume reaksi Volume reaksi (µL)

Kelebihan umur

Sertakan template dalam campuran master (opsional)

Templat sering kali ditambahkan secara terpisah untuk mengurangi risiko kontaminasi dan bias sampel-ke-sampel.

Komponen (mode cepat)

Nama campuran master

Campuran utama (stok ×) Campuran utama (final ×)

Primer maju (stok µM) Primer maju (µM akhir)

Primer terbalik (stok µM) Primer terbalik (µM akhir)

Gunakan probe (opsional)

Templat (µL / reaksi)

Air dihitung sebagai volume yang tersisa untuk mencapai volume reaksi.

Komponen (mode lanjutan)

Masukkan tepat satu air (isi hingga volume). Matikan “sertakan template dalam campuran master” untuk menambahkan template secara terpisah.

Dalam campuran utama	Komponen	Modus	Parameter

Tabel bergulir secara horizontal.

Hitung otomatis pada input

Hasil

Reaksi (sumur)

—

Reaksi yang telah disiapkan (termasuk kelebihan penggunaan)

—

Volume reaksi

—

Dispens per sumur (campuran utama)

—

Total volume campuran master

—

Tabel komponen

Komponen	Per reaksi (µL)	Jumlah (µL)	Catatan

Tabel bergulir secara horizontal.

“Terpisah” menunjukkan komponen yang biasanya ditambahkan di luar campuran utama (misalnya, templat).

Protokol (siap disalin)

—

Bagikan URL / Ekspor

URL yang dibagikan mencakup masukan (termasuk komponen) dan bisa panjang.

Bagaimana cara menghitungnya

Dari konsentrasi hingga volume: Menggunakan C1V1=C2V2, V1 = (C_final / C_stock) × Vtotal.
Lipat konsentrasi (2×/5×): V = (final_x / stock_x) × Vtotal (biasanya final = 1×).
Kelebihan umur: Persentase dibulatkan ke atas (ceil), yang disiapkan = ceil(sumur × (1 + persen/100)).
Air (isi): Air = Vtotal − ΣV(komponen). Negatif berarti kesalahan.
Total: Komponen yang termasuk dalam campuran master menggunakan hitungan yang telah disiapkan; komponen terpisah menggunakan hitungan sumur (dapat diubah).

Alat ini hanya menghitung volume; itu tidak menjamin keberhasilan eksperimen.

FAQ

Apa itu campuran utama?

Campuran master adalah campuran reagen umum yang disiapkan untuk berbagai reaksi. Ini mengurangi langkah-langkah pemipetan dan variabilitas.

Berapa banyak kelebihan yang harus saya tambahkan?

Panduan umumnya adalah 5–10% atau +1 reaksi. Sesuaikan berdasarkan jumlah pemipetan dan reaksi.

Bagaimana cara memasukkan master mix 2× (atau 5×)?

Masukkan sebagai konsentrasi lipatan. Agar campuran 2× mencapai 1× final, volumenya sekitar setengah volume reaksi (dihitung secara otomatis).

Haruskah template disertakan dalam master mix?

Seringkali template ditambahkan secara terpisah untuk mengurangi risiko kontaminasi dan bias sampel-ke-sampel. Alat ini defaultnya adalah penambahan terpisah (dapat diubah).

Mengapa volume airnya negatif?

Total komponen melebihi volume reaksi. Menambah volume reaksi atau memperkecil volume komponen (terutama templat).

Saya mendapat volume yang sangat kecil (misalnya 0,1 µL).

Volume seperti itu sulit untuk dipipet. Pertimbangkan pengenceran menengah atau penyesuaian volume reaksi.

Bisakah saya menggunakan ini untuk qPCR?

Ya. Masukkan campuran 2× qPCR dan konsentrasi primer untuk menghitung volume total.

Panduan suhu anil → Kalkulator Primer Tm
Mengkloning volume campuran → Rasio molar ligasi → DNA campuran perakitan
Telusuri alat biologi → Kalkulator biologi

Umpan balik

Laporkan masalah atau bagikan permintaan untuk membantu menyempurnakan alat ini.