كيفية الاستخدام (3 خطوات)
- اختر مثالاً أو أدخل حجم التفاعل وعدد التفاعلات (أو لوحة البئر 96/384).
- تعيين الزائد (على سبيل المثال، 10%) والمكونات (2 × مزيج، الإشعال، وما إلى ذلك).
- يتم عرض وحدات التخزين لكل رد فعل، والمجاميع مع الفائض، وبروتوكول بيبيتينج.
هذه الأداة تحسب الكميات فقط. تحسين الظروف بشكل منفصل.
المدخلات
النتائج
جدول المكونات
| مكون | لكل رد فعل (ميليلتر) | المجموع (ميليلتر) | ملاحظات |
|---|
يتم تمرير الجدول أفقيًا.
يشير "منفصل" إلى المكونات التي تتم إضافتها عادةً خارج المزيج الرئيسي (على سبيل المثال، القالب).
البروتوكول (جاهز للنسخ)
—
مشاركة URL / تصدير
تشتمل عناوين URL الخاصة بالمشاركة على مدخلات (بما في ذلك المكونات) ويمكن أن تكون طويلة.
كيف يتم حسابها
- من التركيز إلى الحجم: باستخدام C1V1=C2V2، V1 = (C_final / C_stock) × Vtotal.
- تركيز الطية (2×/5×): V = (final_x / Stock_x) × Vtotal (عادةً ما يكون نهائيًا = 1×).
- فائض: يتم تقريب النسبة المئوية (السقف)، أعدت = السقف (الآبار × (1 + نسبة مئوية/100)).
- الماء (ملء): الماء = Vtotal - ΣV (مكون). السلبية تعني خطأ.
- المجاميع: المكونات المضمنة في المزيج الرئيسي تستخدم العدد المعد؛ تستخدم المكونات المنفصلة عدد الآبار (قابل للتبديل).
هذه الأداة تحسب الكميات فقط؛ فهو لا يضمن النجاح التجريبي.
الأسئلة الشائعة
ما هو المزيج الرئيسي؟
المزيج الرئيسي عبارة عن مزيج كاشف شائع تم إعداده لتفاعلات متعددة. أنه يقلل من الخطوات بيبيتينج والتقلب.
ما مقدار الفائض الذي يجب أن أضيفه؟
الدليل النموذجي هو تفاعل 5-10% أو +1. ضبط على أساس بيبيتينج وعدد التفاعل.
كيف يمكنني إدخال مزيج رئيسي 2× (أو 5×)؟
أدخله كتركيز أضعاف. لكي يصل مزيج 2× إلى 1× نهائي، يكون الحجم حوالي نصف حجم التفاعل (يتم حسابه تلقائيًا).
هل يجب تضمين القالب في المزيج الرئيسي؟
غالبًا ما يتم إضافة القالب بشكل منفصل لتقليل مخاطر التلوث والتحيز من عينة إلى عينة. تقوم هذه الأداة افتراضيًا بفصل الإضافة (قابلة للتبديل).
لماذا حجم الماء سلبي؟
مجاميع المكونات تتجاوز حجم التفاعل. زيادة حجم التفاعل أو تقليل أحجام المكونات (خاصة القالب).
حصلت على حجم صغير جدًا (على سبيل المثال، 0.1 ميكرولتر).
من الصعب ماصة مثل هذه الكميات. فكر في التخفيف المتوسط أو ضبط حجم التفاعل.
هل يمكنني استخدام هذا لـ qPCR؟
نعم. أدخل مزيج 2 × qPCR وتركيزات التمهيدي لحساب الحجم الإجمالي.
الأدوات ذات الصلة
- الصلب دليل درجة الحرارة → حاسبة التمهيدي Tm
- أحجام مزيج الاستنساخ → ربط نسبة المولي → DNA مزيج التجميع
- تصفح أدوات علم الأحياء → الآلات الحاسبة البيولوجية
ردود الفعل
قم بالإبلاغ عن المشكلات أو طلبات المشاركة للمساعدة في تحسين هذه الأداة.